周圍神經(jīng)再生條件液中活性蛋白的篩選研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩62頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:研究神經(jīng)再生條件液(NRCF)中具有神經(jīng)再生趨化活性的蛋白成分,重點(diǎn)對(duì)232~440 kDa蛋白條帶進(jìn)行分離和定性。對(duì)其中可能具有趨化活性的成分進(jìn)行神經(jīng)生物活性檢測。 方法: 1) 建立兔坐骨神經(jīng)再生室模型,采集NRCF進(jìn)行自然膠電泳分離,并切取232~440 kDa蛋白條帶。 2) 采用鳥槍(Shotgun)蛋白質(zhì)組學(xué)策略對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定。 3) 在培養(yǎng)的鼠大腦皮層神經(jīng)元中加入外源性C3蛋白,WS

2、T–8法檢測其對(duì)神經(jīng)元的活力影響。選用β-Tubulin和MAP2兩種免疫熒光染色區(qū)分神經(jīng)元樹突和軸突,并應(yīng)用神經(jīng)元形態(tài)分析軟件Neurolucida 對(duì)神經(jīng)元突起長度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果: 1) 在神經(jīng)再生室獲取NRCF約800μl。電泳結(jié)果顯示在232~440kDa間有1條蛋白條帶。 2) Shotgun質(zhì)譜分析該條帶鑒定出54種蛋白。其中不存在已知的神經(jīng)生長因子。應(yīng)用功能域篩選發(fā)現(xiàn)補(bǔ)體C3樣因子的C末端和神

3、經(jīng)突起生長因子Netrin的C末端同樣存在NTR組件。 3) 低劑量(1~5μg/ml )補(bǔ)體C3對(duì)神經(jīng)元存活率與對(duì)照組無差異,但明顯增加鼠大腦皮層神經(jīng)元軸突和樹突長度,尤以1μg/ml C3處理組軸突增長最顯著(約60%);C3a受體拮抗劑SB290157拮抗補(bǔ)體C3的促突起生長作用。 結(jié)論: 1) 本研究初步支持NRCF中232~440kDa蛋白條帶中的C3樣蛋白可作為一具有神經(jīng)生物活性的因子進(jìn)行深入研究。

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論