靶器官電刺激促進大鼠周圍神經(jīng)再生和功能恢復.pdf

1、目的：
　　周圍神經(jīng)損傷的發(fā)病率呈逐年增加的趨勢，神經(jīng)損傷后的修復過程極其復雜，靶器官在修復過程中占有不可忽視的作用。為了探討靶器官在外周神經(jīng)損傷后作用，以及電刺激靶器官促進神經(jīng)再生及其機制，檢測再生神經(jīng)數(shù)量和髓鞘成熟度，神經(jīng)肌肉的運動和感覺功能的恢復，從神經(jīng)肌肉形態(tài)學、功能學、行為學評價其修復周圍神經(jīng)損傷的效果。
　　方法：
　　1、采用坐骨神經(jīng)損傷模型上，給予電刺激治療（1h/d、100ms、500μA、2w）。觀

2、察術后8w通過腓腸肌濕重比、肌力檢測、HE染色、乙酰膽堿受體染色，肌肉中成肌因子家族蛋白的表達；
　　2、在體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌細胞系（L6），對骨骼肌細胞進行電刺激，檢測肌細胞增殖和凋亡能力，并觀察其成肌因子家族（MRFs）的變化；
　　3、坐骨神經(jīng)損傷模型中，檢測再生遠端神經(jīng)的免疫熒光染色、甲苯胺藍染色、電鏡、神經(jīng)電生理、足跡步態(tài)分析，從形態(tài)學到行為學，觀察再生神經(jīng)修復和靶器官功能恢復的效果；
　　4、股神經(jīng)損傷模型

3、，同樣給予相同的電刺激治療方案，術后8w，通過足跡步態(tài)和逆向追蹤法，檢測再生神經(jīng)修復和運動神經(jīng)元選擇性再生，以及靶器官功能恢復的效果；
　　5、觀察靶器官電刺激對再生神經(jīng)遠端神經(jīng)營養(yǎng)因子（NTF）的mRNA水平表達的影響并研究其作用機制。
　　結果：
　　1、大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型中，電刺激組腓腸肌濕重比和肌力檢測均大于對照組；HE染色結果顯示：電刺激組平均肌纖維面積大于對照組；電刺激組單位面積內(nèi)乙酰膽堿受體數(shù)量更多（P

4、<0.05;vs. Ctrl）。電刺激組成肌因子家族在肌肉中的蛋白水平和肌細胞中的mRNA水平表達均上調(diào)（P<0.05;vs. Ctrl）。電刺激有效的減緩了失神經(jīng)的肌肉萎縮。
　　2、遠端再生神經(jīng)免疫熒光和甲苯胺藍染色顯示ES組再生神經(jīng)纖維數(shù)量多于對照組；且電子顯微鏡結果表明，ES組的再生神經(jīng)髓鞘成熟度更好（再生神經(jīng)數(shù)量，軸突直徑，髓鞘厚度和G值比）（P<0.05;vs. Ctrl）。電刺激促進外周神經(jīng)損傷后修復再生。
　

5、　3、股神經(jīng)模型中，電刺激治療明顯增加了再生神經(jīng)元的數(shù)量和運動神經(jīng)元的正確投射比例（P<0.05;vs. Ctrl），坐骨神經(jīng)損傷模型術后8周，復合肌肉動作電位（CMAP），神經(jīng)干電位（NAP）和坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（SFI）檢測的所有數(shù)據(jù)證明電刺激治療效果顯著。再生神經(jīng)內(nèi)神經(jīng)細胞黏附因子（NCAM）和神經(jīng)營養(yǎng)因子（NTF）在蛋白和mRNA水平表達都明顯上升（P<0.05;vs. Ctrl）。
　　結論：
　　靶器官電刺激治療外