靶器官電刺激促進(jìn)大鼠周圍神經(jīng)再生和功能恢復(fù).pdf

1、目的：
　　周圍神經(jīng)損傷的發(fā)病率呈逐年增加的趨勢，神經(jīng)損傷后的修復(fù)過程極其復(fù)雜，靶器官在修復(fù)過程中占有不可忽視的作用。為了探討靶器官在外周神經(jīng)損傷后作用，以及電刺激靶器官促進(jìn)神經(jīng)再生及其機(jī)制，檢測再生神經(jīng)數(shù)量和髓鞘成熟度，神經(jīng)肌肉的運(yùn)動(dòng)和感覺功能的恢復(fù)，從神經(jīng)肌肉形態(tài)學(xué)、功能學(xué)、行為學(xué)評(píng)價(jià)其修復(fù)周圍神經(jīng)損傷的效果。
　　方法：
　　1、采用坐骨神經(jīng)損傷模型上，給予電刺激治療（1h/d、100ms、500μA、2w）。觀

2、察術(shù)后8w通過腓腸肌濕重比、肌力檢測、HE染色、乙酰膽堿受體染色，肌肉中成肌因子家族蛋白的表達(dá)；
　　2、在體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌細(xì)胞系（L6），對(duì)骨骼肌細(xì)胞進(jìn)行電刺激，檢測肌細(xì)胞增殖和凋亡能力，并觀察其成肌因子家族（MRFs）的變化；
　　3、坐骨神經(jīng)損傷模型中，檢測再生遠(yuǎn)端神經(jīng)的免疫熒光染色、甲苯胺藍(lán)染色、電鏡、神經(jīng)電生理、足跡步態(tài)分析，從形態(tài)學(xué)到行為學(xué)，觀察再生神經(jīng)修復(fù)和靶器官功能恢復(fù)的效果；
　　4、股神經(jīng)損傷模型

3、，同樣給予相同的電刺激治療方案，術(shù)后8w，通過足跡步態(tài)和逆向追蹤法，檢測再生神經(jīng)修復(fù)和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元選擇性再生，以及靶器官功能恢復(fù)的效果；
　　5、觀察靶器官電刺激對(duì)再生神經(jīng)遠(yuǎn)端神經(jīng)營養(yǎng)因子（NTF）的mRNA水平表達(dá)的影響并研究其作用機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型中，電刺激組腓腸肌濕重比和肌力檢測均大于對(duì)照組；HE染色結(jié)果顯示：電刺激組平均肌纖維面積大于對(duì)照組；電刺激組單位面積內(nèi)乙酰膽堿受體數(shù)量更多（P

4、<0.05;vs. Ctrl）。電刺激組成肌因子家族在肌肉中的蛋白水平和肌細(xì)胞中的mRNA水平表達(dá)均上調(diào)（P<0.05;vs. Ctrl）。電刺激有效的減緩了失神經(jīng)的肌肉萎縮。
　　2、遠(yuǎn)端再生神經(jīng)免疫熒光和甲苯胺藍(lán)染色顯示ES組再生神經(jīng)纖維數(shù)量多于對(duì)照組；且電子顯微鏡結(jié)果表明，ES組的再生神經(jīng)髓鞘成熟度更好（再生神經(jīng)數(shù)量，軸突直徑，髓鞘厚度和G值比）（P<0.05;vs. Ctrl）。電刺激促進(jìn)外周神經(jīng)損傷后修復(fù)再生。
　

5、　3、股神經(jīng)模型中，電刺激治療明顯增加了再生神經(jīng)元的數(shù)量和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的正確投射比例（P<0.05;vs. Ctrl），坐骨神經(jīng)損傷模型術(shù)后8周，復(fù)合肌肉動(dòng)作電位（CMAP），神經(jīng)干電位（NAP）和坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（SFI）檢測的所有數(shù)據(jù)證明電刺激治療效果顯著。再生神經(jīng)內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞黏附因子（NCAM）和神經(jīng)營養(yǎng)因子（NTF）在蛋白和mRNA水平表達(dá)都明顯上升（P<0.05;vs. Ctrl）。
　　結(jié)論：
　　靶器官電刺激治療外