花蓋紅菇菌絲體提取物的體外功效及化學(xué)成分分析研究.pdf

1、高等真菌不僅種類繁多，而且“創(chuàng)造系數(shù)”也很高，含多種多樣的生物活性物質(zhì)，如萜類、黃酮類、酚類物質(zhì)，凝集素，甾類化合物等，這些天然生物活性物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)多樣而且新穎，這種化學(xué)結(jié)構(gòu)的多樣性對(duì)于現(xiàn)代保健品、藥物的開發(fā)和農(nóng)藥先導(dǎo)物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)至關(guān)重要。近年來，國內(nèi)外對(duì)高等真菌天然生物活性物質(zhì)的研究開發(fā)愈來愈重視。一方面是因?yàn)閺母叩日婢胁粩喟l(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎和具有顯著生物活性的化合物，且結(jié)構(gòu)變化大；另一方面，高等真菌不僅可以直接采來子實(shí)體作為研究材料，而且

2、可以較方便地通過菌絲體或孢子發(fā)酵培養(yǎng)，提供大量原料資源。這為今后可能的工業(yè)化生產(chǎn)提供了保證。本研究以野生花蓋紅菇菌絲體為材料，研究了菌絲體的搖瓶培養(yǎng)條件；對(duì)培養(yǎng)液及菌絲體提取物進(jìn)行了抗氧化和抗腫瘤活性檢測(cè)；對(duì)生物活性較好的菌絲體乙醇相提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定研究，結(jié)果如下： 1.以葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、可溶性淀粉為碳源；蛋白胨、酵母膏、硫酸銨、硝酸銨、黃豆粉為氮源；硫酸亞鐵、硫酸鎂、磷酸二氫鉀為無機(jī)鹽；以菌

3、絲體干重為指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)花蓋紅菇的最適培養(yǎng)基進(jìn)行了篩選。結(jié)果顯示：花蓋紅菇的最適碳源為可溶性淀粉，最適氮源為蛋白胨+酵母膏，確定的最適培養(yǎng)基配方為：可溶性淀粉3％、蛋白胨0.3％、酵母膏0.3％、KH2PO40.05％。 在確定最適培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)不同的溫度、pH值、裝液量和接種量，通過正交試驗(yàn)確定其最適搖瓶培養(yǎng)條件。結(jié)果為：溫度27℃，初始pH6.2左右，裝液量250 mL/500mL，接種量10 mL，搖

4、床轉(zhuǎn)速150 r/min，培養(yǎng)時(shí)間為4d。 2.采用搖瓶法獲得花蓋紅菇搖瓶培養(yǎng)物，用不同極性的有機(jī)溶劑對(duì)培養(yǎng)液及菌絲體分別進(jìn)行抽提，得到不同來源的提取物。采用體外清除DPPH'自由基實(shí)驗(yàn)、抑制小鼠肝脂質(zhì)過氧化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各提取物的抗氧化活性，結(jié)果顯示：培養(yǎng)液乙酸乙酯相，菌絲體乙酸乙酯相、乙醇相中的活性物質(zhì)均有較高的抗氧化活性，其中以培養(yǎng)液的乙酸乙酯相活性最高。 以H446肺癌細(xì)胞株為材料，采用MTT法測(cè)定各提取物的抗腫瘤活性