中藥野馬追的化學(xué)成分分析研究.pdf

1、野馬追是菊科植物輪葉澤蘭Eupatorium lindleyanum DC的全草,含有黃酮類、生物堿、揮發(fā)油、香豆精等.中醫(yī)藥理認(rèn)為本品苦、平,具有清熱解毒、祛痰、定喘、降血壓等功效,用于治療慢性氣管炎、支氣管炎、高血壓等疾病.野馬追的主要產(chǎn)地為江蘇盱眙.有關(guān)野馬追化學(xué)成分的分析報道較少,本論文采用現(xiàn)代分析方法對它的化學(xué)成分進(jìn)行了分析.采用干法和濕法消解,電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES)同時測定了野馬追全草和花蕾中無機(jī)元素

2、.干法先將樣品于600℃高溫灰化,再用濃硝酸溶解,濕法用HNO<,3>-HClO<,4>直接消解.結(jié)果表明:盱眙野馬追中含有Fe、Al、Si等多種無機(jī)元素,其含量占全草的3.45﹪左右.其中Fe、Cu、Mn、Zn、Sr、Ni、Cr等是人體必需微量元素.用柱前衍生反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測定了江蘇地產(chǎn)藥材野馬追及其花蕾中的總氨基酸和游離氨基酸.用鄰苯二甲醛(OPA)與一氯甲酸芴甲酯(FMOC)聯(lián)用全自動柱前衍生化反相高效液相色

3、譜儀,liozospheze C<,18>柱,pH=7.2的醋酸鈉緩沖溶液和甲醇為流動相,流速為1.0ml/min,熒光檢測器,波長為Ex=340nm Em=450nm,樣品中的氨基酸在30min內(nèi)得到分離和檢測.結(jié)果表明:野馬追及其花蕾中含半胱氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等17種氨基酸和游離氨基酸,總氨基酸含量分別為2.396﹪和6.510﹪,游離氨基酸含量分別1.846‰和5.079‰,半胱氨酸(cys)和谷氨酸

4、(glu)含量較高,其中7種為人體必需氨基酸.用氣相色譜-質(zhì)譜法對野馬追花蕾的揮發(fā)油進(jìn)行了化學(xué)成分的分析.采用水蒸氣蒸餾法從野馬追花蕾中提取揮發(fā)油.用不同類型的毛細(xì)管柱進(jìn)行氣相色譜分離,確定最佳分析條件為:DB-5玻璃毛細(xì)管色譜柱(商業(yè)用毛細(xì)管柱)30m×φ0.32mm,柱溫從60℃(保持6 min)程序升溫至280℃,10℃/min;檢測器為FID;汽化室及檢測室溫度為250℃;載氣為高純氮,60ml/min,分流比為60:1.用氣相

5、色譜-質(zhì)譜法對其化學(xué)成分進(jìn)行鑒定,共鑒定了19個成分,用歸-化法測定各組分的相對百分含量,占揮發(fā)油總成分的57.13﹪.用95﹪的乙醇作為提取劑,分別采用冷浸法、加熱回流法和超聲法三種提取方法提取了野馬追中的總黃酮,用蘆丁作為對照品,硝酸鋁-亞硝酸鈉紫外分光光度法測定野馬追中總黃酮含量.在選定的實(shí)驗(yàn)條件下,蘆丁的濃度和吸光度呈良好的線性關(guān)系,標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)為0.9999,測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.27~1.63﹪,平均回收率為98.2

6、0﹪.結(jié)果顯示:野馬追中含大量黃酮類化合物,含量在2﹪左右;不同提取方法比較,加熱回流法黃酮的浸出率最高.用和提取野馬追總黃酮相似的方法,以乙醇作為提取劑,提取野馬追中的化學(xué)成分,然后用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分別對其乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了分析,給出了33個典型成分的相對百分含量和其中26個化合物的參考結(jié)構(gòu).通過對三種提取方法的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析總離子流色譜圖的峰位置進(jìn)行比較,說明乙醇加熱回流法和超聲提取法對化合物的結(jié)構(gòu)不造成破壞.