多巴胺D5受體轉(zhuǎn)基因小鼠的建立及其生理學(xué)研究.pdf

1、多巴胺屬于兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)，是去甲腎上腺素和腎上腺素的前體。但是，研究發(fā)現(xiàn)其通過外周多巴胺系統(tǒng)對(duì)機(jī)體的血壓、水鈉代謝平衡等起到重要的調(diào)節(jié)作用。為了進(jìn)一步研究多巴胺D5受體在高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用，我們利用顯微注射的技術(shù)構(gòu)建了轉(zhuǎn)人多巴胺D5突變基因D5F1731L和D5S390G及正常人D5基因hD5WT小鼠。運(yùn)用PCR和Western Blotting方法鑒定轉(zhuǎn)基因小鼠的基因型和該受體蛋白在腎臟的表達(dá)情況，使用智能無創(chuàng)血壓測(cè)量?jī)x測(cè)量轉(zhuǎn)

2、基因小鼠的血壓值，并同時(shí)利用超聲心動(dòng)儀反映該轉(zhuǎn)基因小鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能變化。 本研究首先分別建立轉(zhuǎn)人多巴胺D5突變基因D5F173L和D5S390G及正常人D5基因hD5WT小鼠。Western Blot結(jié)果表明，PCR方法鑒定基因型為陽性的轉(zhuǎn)基因小鼠腎臟多巴胺受體蛋白表達(dá)高于同窩陰性對(duì)照鼠。三月齡至六月齡D5F173L、D5S390G和hD5WT轉(zhuǎn)基因小鼠和陰性對(duì)照小鼠的血壓結(jié)果顯示，各月齡D5F173L轉(zhuǎn)基因小鼠的收縮壓、舒張

3、壓和平均動(dòng)脈血壓均明顯高于hD5WT轉(zhuǎn)基因小鼠及陰性對(duì)照小鼠(n=6，P<0.05)，但同種轉(zhuǎn)基因小鼠各月齡間收縮壓、舒張壓及平均壓沒有明顯變化。超聲心動(dòng)儀結(jié)果顯示各月齡D5F173L轉(zhuǎn)基因小鼠的舒張期與收縮期左心室內(nèi)體積與左心室內(nèi)徑均明顯小于多巴胺hD5WT轉(zhuǎn)基因小鼠及陰性對(duì)照小鼠(n=6，P<0.05)，而各月齡D5F173L轉(zhuǎn)基因小鼠舒張期與收縮期左心室前后壁厚度及左心室重量則明顯高于多巴胺hD5WT轉(zhuǎn)基因小鼠及陰性對(duì)照小鼠(n=

4、6，P<0.05)。此外D5F173L基因小鼠舒張期與收縮期左室內(nèi)體積與左室內(nèi)徑均隨年齡的增長(zhǎng)(四月齡至六月齡)呈現(xiàn)減小的趨勢(shì)且與多巴胺hD5WT轉(zhuǎn)基因小鼠及陰性對(duì)照小鼠比較具有顯著差異(n=6，P<0.05)，同時(shí)D5F173L轉(zhuǎn)基因小鼠舒張期與收縮期左心室前后壁厚度隨年齡的增長(zhǎng)呈增加趨勢(shì)且與多巴胺hD5WT轉(zhuǎn)基因小鼠及陰性對(duì)照小鼠比較具有顯著差異(n=6，P<0.05)。 以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明多巴胺D5受體對(duì)于機(jī)體血壓和心臟結(jié)構(gòu)