機(jī)械刺激后大鼠牙髓HSP70表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文機(jī)械刺激后大鼠牙髓HSP70表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化姓名：謝紅玉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：周杰2002.1.1時(shí)觀察組各4只大鼠。將對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組大鼠均用04％戊巴比妥鈉按1毫升／100克體重劑量進(jìn)行腹腔麻醉，對(duì)照組大鼠麻醉后即處死，實(shí)驗(yàn)組大鼠麻醉后固定，用307—6臺(tái)鉆(上海齒科醫(yī)療器械廠，轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)／分鐘)在其左右上頜第一磨牙猞面正中進(jìn)行機(jī)械刺激(刺激時(shí)間控制在15min左右)，分別于刺激后即刻

2、，刺激后4小時(shí)、8小時(shí)、24小時(shí)各處死4只大鼠。大鼠處死后立即取左右上頜第一磨牙及附近部分牙槽骨組織，生理鹽水沖洗，置4％多聚甲醛固定液內(nèi)并作好標(biāo)記，4℃冰箱內(nèi)固定24小時(shí)，將標(biāo)本取出置于8mol／L甲酸一lmoL／L甲酸鈉復(fù)合脫鈣液內(nèi)，4℃脫鈣20天，每天更換脫鈣液并修剪組織塊。脫鈣完成后將組織塊進(jìn)行酒精梯度脫水，二甲苯透明，浸蠟，石蠟包埋，切片機(jī)制備冠根縱向石蠟切片，片厚5斗m。進(jìn)行HE染色及HsP70免疫組織化學(xué)染色(兔抗HsP7

3、0多克隆抗體，SP法)?？瞻讓?duì)照實(shí)驗(yàn)以PBS替代I抗，其余染色步驟相同。利用coolsnapK顯微照相系統(tǒng)(Roper，J印an)及Me洲orph分析軟件(UIC，US)對(duì)免疫組化染色標(biāo)本進(jìn)行圖象分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果免疫組織化學(xué)染色結(jié)果表明，HsP70在正常未受到刺激的牙髓內(nèi)及刺激后不同時(shí)間的牙髓內(nèi)均有表達(dá)，HSP70普遍存在于牙髓中各種細(xì)胞內(nèi)，成牙本質(zhì)細(xì)胞及胞漿突起、牙髓成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及管壁平滑肌細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)均有表達(dá)，其中又