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1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文機械刺激后大鼠牙髓HSP70表達的動態(tài)變化姓名:謝紅玉申請學位級別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學指導教師:周杰2002.1.1時觀察組各4只大鼠。將對照組及實驗組大鼠均用04%戊巴比妥鈉按1毫升/100克體重劑量進行腹腔麻醉,對照組大鼠麻醉后即處死,實驗組大鼠麻醉后固定,用307—6臺鉆(上海齒科醫(yī)療器械廠,轉速3000轉/分鐘)在其左右上頜第一磨牙猞面正中進行機械刺激(刺激時間控制在15min左右),分別于刺激后即刻
2、,刺激后4小時、8小時、24小時各處死4只大鼠。大鼠處死后立即取左右上頜第一磨牙及附近部分牙槽骨組織,生理鹽水沖洗,置4%多聚甲醛固定液內并作好標記,4℃冰箱內固定24小時,將標本取出置于8mol/L甲酸一lmoL/L甲酸鈉復合脫鈣液內,4℃脫鈣20天,每天更換脫鈣液并修剪組織塊。脫鈣完成后將組織塊進行酒精梯度脫水,二甲苯透明,浸蠟,石蠟包埋,切片機制備冠根縱向石蠟切片,片厚5斗m。進行HE染色及HsP70免疫組織化學染色(兔抗HsP7
3、0多克隆抗體,SP法)??瞻讓φ諏嶒炓訮BS替代I抗,其余染色步驟相同。利用coolsnapK顯微照相系統(tǒng)(Roper,J印an)及Me洲orph分析軟件(UIC,US)對免疫組化染色標本進行圖象分析。實驗結果免疫組織化學染色結果表明,HsP70在正常未受到刺激的牙髓內及刺激后不同時間的牙髓內均有表達,HSP70普遍存在于牙髓中各種細胞內,成牙本質細胞及胞漿突起、牙髓成纖維細胞、血管內皮細胞及管壁平滑肌細胞、神經節(jié)細胞內均有表達,其中又
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