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1、目的:探討建立眼眶損傷后出現(xiàn)軟組織粘連實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷目尚行?,通過(guò)對(duì)家兔上直肌及其相對(duì)應(yīng)骨膜的損傷,初步探討家兔眼眶軟組織損傷后粘連形成的機(jī)制;觀察殼聚糖膜對(duì)預(yù)防眼眶損傷后軟組織粘連的預(yù)防作用;通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的進(jìn)行病理學(xué)及免疫組織化學(xué)的檢驗(yàn),初步探討殼聚糖預(yù)防粘連的形成機(jī)制;對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行視神經(jīng)的病理學(xué)觀察和視覺(jué)電生理的檢查,初步觀察殼聚糖對(duì)視神經(jīng)的組織學(xué)影響和視功能的影響。 方法: 1.兔眼眶損傷后軟組織粘連模型的建立取成年
2、健康家兔12只,分為4組。用鹽酸氯胺酮(50mg/kg)和鹽酸氯丙嗪(25mg/kg)肌肉注射麻醉后,從上瞼穹隆結(jié)膜入路,分離軟組織,找到上直肌及其對(duì)應(yīng)的骨膜,用圓形手術(shù)刀片分別搔刮長(zhǎng)度為1cm的上直肌,對(duì)相應(yīng)部位的眶骨膜用同樣的方法搔刮,面積為1cm2,兩處搔刮的次數(shù)各10次,用生理鹽水沖洗損傷面后,縫合上直肌及對(duì)應(yīng)的骨膜損傷面。分別于術(shù)后3天,7天,14天,30天對(duì)搔刮損傷部位粘連情況評(píng)分后,空氣栓塞法處死各組家兔,對(duì)搔刮損傷的部位
3、進(jìn)行組織病理學(xué)檢查和TGF-β<,1>免疫組織化學(xué)染色觀察。 2.殼聚糖預(yù)防兔眼眶損傷后早期軟組織粘連的實(shí)驗(yàn)研究取健康成年家兔15只共30只眼,分為三組,分別為A組(生理鹽水組)、B組(SHA組)、C(CM膜組)。從上穹隆結(jié)膜為入路,分離軟組織,找到上直肌核對(duì)應(yīng)的骨膜,在上直肌與對(duì)應(yīng)骨膜間用試驗(yàn)一的方法制造損傷,各組分別用生理鹽水沖洗損傷面;透明質(zhì)酸鈉凝膠均勻涂抹損傷面;殼聚糖膜置入損傷面之間后縫合上直肌及對(duì)應(yīng)的骨膜損傷面。術(shù)后
4、7天取搔刮損傷的部位進(jìn)行粘連程度評(píng)分;將搔刮損傷區(qū)域組織制成切片,經(jīng)HE染色后觀察炎癥反應(yīng)并評(píng)分;成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù);對(duì)搔刮損傷區(qū)域的切片進(jìn)行TGF-β<,1>免疫組織化學(xué)染色。用SPSSl2.0對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 對(duì)C組所選家兔分別在術(shù)前1天及術(shù)后6天行F-VEP檢查,記錄P<,1>波波幅及波潛時(shí),用SPSSl2.0對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。術(shù)后將視神經(jīng)及其周圍組織制成病理切片,觀察殼聚糖組兔眼視神經(jīng)是否存在病理性毒性反應(yīng)。
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