胰島素樣生長因子—1受體在小鼠氧化損傷性白內(nèi)障和透明晶狀體中的表達(dá).pdf

1、【目的】 研究胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)在小鼠氧化損傷性白內(nèi)障和透明晶狀體上皮細(xì)胞的表達(dá)，為了解白內(nèi)障發(fā)生機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 【方法】 1.采用過氧化氫氧化損傷法，建立實(shí)驗(yàn)性白內(nèi)障晶狀體模型：按隨機(jī)分組原則將成年小鼠透明晶狀體分為空白對照組和實(shí)驗(yàn)組(H2O2組)?？瞻讓φ战M：Medium199培養(yǎng)液+青霉素2×105U·L-1+鏈霉素2.5×105U·L-1；實(shí)驗(yàn)組：空白組培養(yǎng)液+H2O2(終濃度為

2、200μmol·L-1)。每組有24h、48h、72h 3個時限培養(yǎng)組，檢測各組晶狀體透明度。免疫組化法檢測IGF-1R在成年小鼠透明晶狀體和不同程度白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞表達(dá)的水平差異。 2.另取新生小鼠、成年小鼠及老年小鼠透明晶狀體，免疫組化法檢測IGF-1R在不同年齡組透明晶狀體上皮細(xì)胞表達(dá)的水平差異。 【結(jié)果】 1.利用離體晶狀體培養(yǎng)技術(shù)，采用過氧化氫氧化損傷法，成功建立實(shí)驗(yàn)性白內(nèi)障晶狀體模型?？瞻讓φ战M小

3、鼠晶狀體在離體培養(yǎng)條件下保持了其透明度，培養(yǎng)24、48、72小時，晶狀體透明度無明顯改變。實(shí)驗(yàn)組隨著培養(yǎng)時間的延長，晶狀體混濁程度增加，24小時晶狀體出現(xiàn)渾濁，48小時晶狀體渾濁向中央擴(kuò)展，至72小時晶狀體幾乎完全渾濁。對照組及實(shí)驗(yàn)組各個時點(diǎn)晶體透明度比較差異均具有高度顯著性(t-檢驗(yàn)，P<0.001)；對照組在不同培養(yǎng)時間的透明度無顯著性差異(方差分析，F(xiàn)=2.316，P>0.05)，而實(shí)驗(yàn)組在不同培養(yǎng)時間的透明度差異具有顯著性(方差

4、分析，F(xiàn)=43.609，P<0.001)，兩兩比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(LSD-t檢驗(yàn)，P<0.001)。由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，培養(yǎng)時間越長，透明度值越小，即晶狀體越混濁。 2.IGF-1R集中表達(dá)于晶狀體上皮細(xì)胞漿中。在成年小鼠透明晶狀體中表達(dá)中強(qiáng)陽性，24h白內(nèi)障組表達(dá)中等陽性，48h組表達(dá)弱陽性，72h組表達(dá)極少甚至不表達(dá)，差異具有顯著性(Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，P＜0.001)，行相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)rs=-0.725，(

5、P＜0.001)，即隨著過氧化氫培養(yǎng)時間的延長，白內(nèi)障程度加重，IGF-1R的表達(dá)呈逐漸減少趨勢。而在不同年齡組透明晶狀體中，新生小鼠組表達(dá)強(qiáng)陽性，成年小鼠表達(dá)中強(qiáng)陽性，老年小鼠表達(dá)極少甚至不表達(dá)，差異具有顯著性(Kruskal-WaUis檢驗(yàn)，P＜0.001)，行相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)rs=-0.859(P＜0.001)，即隨小鼠年齡增大，IGF-1R表達(dá)亦呈逐漸減少趨勢。 【結(jié)論】 IGF-1R的表達(dá)下調(diào)可能與晶狀體的老