活血化瘀方干預大鼠移植性肝癌MVD和VEGF的實驗研究.pdf

1、目的:通過研究活血化瘀方對大鼠Walker-256移植性肝癌的MVD計數(shù)和VEGF蛋白表達的影響，探討活血化瘀方影響肝癌血管生成的機理。
　　方法:購回SD大鼠90只，清潔級，體重200±20g，飼養(yǎng)5天后按1∶5隨機抽取15只，作為空白組;把walker-256瘤株細胞注射到余下75只大鼠肝臟，誘發(fā)大鼠肝癌模型。造模后7天隨機抽取10只，制作病理標本，證實成模。在造模成功后，將剩下大鼠隨機分為A、B、C、D四組，分別給藥14天。

2、A組給以重組人血管內(nèi)皮抑制素（恩度）按0.75mg·kg-1·d-1劑量處理;B組活血化瘀方以人體等效劑量75mg·kg-1·d-1按10ml·kg-1·d-1處理;C組:以恩度和活血化瘀方聯(lián)合處理;D組（陰性對照組）;以A組的同劑量生理鹽水處理。E組（空白組）:只給以正常飼料喂養(yǎng)。每組于給藥后第7天每組處死7只。每組剩余大鼠第15天處死。收集肝臟標本，HE染色，鏡下觀察腫瘤組織結(jié)構(gòu)，采用顯微鏡計數(shù)法計算微血管密度(MVD)、免疫組化法

3、對血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)蛋白的表達進行檢測。
　　結(jié)果:
　　1、各組大鼠肝癌組織微血管密度(MVD)的結(jié)果:
　　各實驗組大鼠肝癌組織微血管密度(MVD)的結(jié)果顯示:7天后A組、B組、C組、D組、E組肝癌組織MVD分別為:40.25±3.36，41.70±2.23，36.39±3.33，45.08±3.83、12.32±0.49;15天后A組、B組、C組、D組、E組肝癌組織MVD分別為:38.40±4.52，3

4、4.10±2.40，30.30±3.28，44.70±4.10、11.67±0.91。在本次實驗中，E組數(shù)值最低，A、B、C各組MVD的表達較D組均有下降(P＜0.05)。7天后同期A、B組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);B、C兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);A、C兩組相比，C組數(shù)值較低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);15天后同期A、B組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);B、C兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P

5、＜0.05);A、C兩組相比，C組數(shù)值較低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各組前后對比，A、D組差異不明顯(P＞0.05);B、C組數(shù)值隨時間延長而下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;各組和E組相比較，差異明顯，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　2、各組大鼠肝癌組織VEGF表達:
　　VEGF表達:A、B、C、D、E組第7天:4.40±0.39、4.76±0.38、3.73±0.43、5.40±0.54、0.6

6、2±0.21;A、B、C、D、E組第15天:4.23±0.34、3.82±0.48、3.07±0.36、5.23±0.39、0.56±0.31。在本次實驗中，E組數(shù)值最低;A、B、C各組VEGF的表達較D組均有下降(P＜0.05)。7天后同期A、B組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;B、C兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);A、C兩組相比，C組數(shù)值較低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;15天后同期A、B組相比，差異有統(tǒng)計

7、學意義（P＜0.05）;B、C兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);A、C兩組相比，C組數(shù)值較低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各組前后對比，A、D組差異不明顯(P＞0.05);B、C組數(shù)值隨時間延長而下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各組和E組相比較，差異明顯，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1、活血化瘀方能抑制移植性肝癌血管的生長，其與血管生成抑制劑聯(lián)合使用有增效作用。
　　2、