梓葛凍干粉針對血瘀證大鼠的活血化瘀作用研究.pdf

1、背景:
　　 梓葛凍干粉針(Catalpolandpuerarinfreeze-driedpowderforinjection,CPFPI)是本課題組自主研制的治療腦缺血的中藥單體復方制劑,前期已對該制劑的制備工藝和對動物腦缺血模型的改善作用進行了研究,本文觀察其對腦缺血的主要證候血瘀證作用,旨在為將其研制成治療腦缺血的中藥新藥奠定主要藥效學試驗基礎。本課題得到重慶市科技攻關項目(CSTC,2010AC5011)的支持。

2、　　 目的:
　　 以氣虛血瘀證、陰虛血瘀證和熱毒血瘀證大鼠為模型,觀察梓葛凍干粉針對3種血瘀證大鼠凝血功能、血液流變學及NO生成的影響,以探討梓葛凍干粉針的活血化瘀之功效。
　　 方法:
　　 1.造模方法
　　 氣虛血瘀證模型的制備采用饑餓、疲勞、寒濕、驚恐和高脂飲食等方法相結合復制氣虛血瘀證模型。每天造模1次,連續(xù)14d。以體重顯著下降、出現(xiàn)氣虛癥狀、血瘀癥狀和血液流變學指標升高為模型成功標準。<

3、br>　　 陰虛血瘀證模型的制備大鼠肌注氫化可的松注射液10mg·kg-1,連續(xù)14d分別于第14d及第15d取血前1h皮下注射1g·L-1腎上腺素0.5mg·kg-1。
　　 熱毒血瘀證模型的制備除正常組以外,其余各組大鼠給藥7d后,腹腔注射脂多糖500μg·kg-1一次造模,注射脂多糖5h后測肛溫,24h后采血測相關指標。
　　 2.分組與給藥
　　 氣虛血瘀證分組與給藥將造模成功的大鼠隨機分為模型對照組、

4、香丹注射液1.05mL·kg-1組以及梓葛凍干粉針16.40mg·kg-1、32.70mg·kg-1和65.40mg·kg-1組,每組10只,經統(tǒng)計學分析,各組用藥前各項指標無顯著性差異。尾靜脈注射給藥,每天1次,連續(xù)7d。
　　 陰虛血瘀證分組與給藥將正常大鼠按體重隨機分為正常對照組、模型對照組、香丹注射液1.05mL·kg-1組以及梓葛凍干粉針16.40mg·kg-1、32.70mg·kg-1和65.40mg·kg-1組,每

5、組10只。于注射氫化可的松注射液第7d開始,尾靜脈注射給藥,每天1次,連續(xù)7d。
　　 熱毒血瘀證分組與給藥將正常大鼠按體重隨機分為正常對照組、模型對照組、注射賴氨匹林378.00mg·kg-1組、梓葛凍干粉針16.40mg·kg-1、32.70mg·kg-1和65.40mg·kg-1組,每組10只,每天1次,連續(xù)7d。
　　 3.檢測指標
　　 采用玻片法測定凝血時間(CT)和斷尾法測定出血時間(BT);眼眶采

6、血,分離血漿,測定凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT);股動脈采血,測定血液流變學指標:全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積、全血還原黏度、紅細胞聚集指數、紅細胞剛性指數;分離血清,酶法測定血清中NO含量。
　　 結果:
　　 1.梓葛凍干粉針對氣虛血瘀證模型大鼠的影響
　　 梓葛凍干粉針對氣虛血瘀證模型大鼠凝血功能的影響與正常組相比,模型組大鼠的CT、BT、PT、APTT和TT顯著

7、縮短(P＜0.05或P＜0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能極顯著延長CT(P＜0.01),其延長率為56.10%;梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1組能顯著延長BT(P＜0.05或P＜0.01),延長率分別為26.40%、42.96%;梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善PT、APTT(P＜0.05);梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1組能極顯著改善PT、APTT和

8、TT(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 梓葛凍干粉針對氣虛血瘀證模型大鼠血液流變學的影響與正常組相比,模型組全血黏度、全血還原黏度、血漿黏度、紅細胞聚集指數和剛性指數均顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善全血黏度、全血還原黏度、紅細胞聚集指數(P＜0.05或P＜0.01),梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能顯著改善血液流變學的各項指標(P＜0.05或P＜0

9、.01)。
　　 梓葛凍干粉針對氣虛血瘀證模型大鼠NO的影響與正常組相比,模型組NO含量極顯著降低(P＜0.01);與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1能極顯著升高氣虛血瘀證大鼠血清中NO的含量(P＜0.01)。
　　 2.梓葛凍干粉針對陰虛血瘀證模型大鼠的影響
　　 梓葛凍干粉針對陰虛血瘀證模型大鼠凝血功能的影響與正常組相比,模型組PT、APTT和TT均極顯著縮短(P＜0

10、.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1組顯著改善PT、APTT和TT(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 梓葛凍干粉針對陰虛血瘀證模型大鼠血液流變學的影響與正常組相比,模型組全血黏度、全血還原黏度、血漿黏度、紅細胞聚集指數和剛性指數均顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善全血黏度、全血還原黏度、紅細胞聚集指數(P＜0

11、.05),梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能顯著改善血液流變學的各項指標(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 梓葛凍干粉針對陰虛血瘀證模型大鼠NO的影響與正常對照組相比,模型組NO含量極顯著降低(P＜0.01);與模型對照組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1能極顯著提高血清中NO的含量(P＜0.01)。
　　 3.梓葛凍干粉針對熱毒血瘀證模型大鼠的影響
　　 梓葛凍千粉針對

12、熱毒血瘀證模型大鼠體溫的影響與正常組相比,模型組大鼠造模前后體溫的差值極顯著升高(P＜0.01):與模型組相比梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1組極顯著降低發(fā)熱大鼠的體溫(P＜0.01)。
　　 梓葛凍干粉針對熱毒血瘀證模型大鼠凝血功能的影響與正常組相比,模型組PT、APTT和TT均顯著縮短(P＜0.05或P＜0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善TT(P＜0.05

13、);梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1組能顯著改善PT和TT(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 梓葛凍干粉針對熱毒血瘀證模型大鼠血液流變學的影響與正常組相比,模型組全血黏度、全血還原黏度、紅細胞聚集指數和剛性指數均極顯著升高(P＜0.01)。與模型組比較,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善全血黏度(P＜0.05),梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能顯著改善全血黏度、全血還原黏度高切和紅細胞聚集指數等指標(