三個(gè)家馬品種泌乳相關(guān)基因多態(tài)性及其與伊犁馬產(chǎn)奶量的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、馬奶含有豐富的維生素和礦物質(zhì)，營養(yǎng)價(jià)值極高，但其產(chǎn)量遠(yuǎn)低于牛奶。隨著人民生活水平的提高，馬奶的需求量增加，加強(qiáng)馬泌乳遺傳基礎(chǔ)研究，開發(fā)相關(guān)的分子標(biāo)記，培育乳用馬品種勢在必行。本研究選擇了9個(gè)家畜泌乳性能候選基因:催乳素(PRL)及催乳素受體基因(PRLR)、垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子1(POU1F1)、生長激素1（GH1）及生長激素受體基因(GHR)、乳鐵蛋白基因(LTF)、雌激素受體基因(ESR1、ESR2)和三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成

2、員2基因(ABCG2)，根據(jù)NCBI提供的基因序列設(shè)計(jì)擴(kuò)增CDS區(qū)序列，以3個(gè)中國家馬品種（伊犁馬、關(guān)中馬和蒙古馬）共337匹馬為研究對象，測序檢測鑒定候選基因CDS區(qū)的單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)，采用PCR-RFLP技術(shù)對其進(jìn)行分型，并將伊犁馬上發(fā)現(xiàn)SNP位點(diǎn)與伊犁馬日均產(chǎn)奶量進(jìn)行單因素方差分析，獲得如下研究結(jié)果：
　　1.在3個(gè)中國家馬品種9個(gè)泌乳相關(guān)基因中檢測到10個(gè)SNPs(PRL c.210C＞T，PRL g.9115T＞G,PR

3、L g.9119C＞A,PRL g.11090A＞G,PRLR g.145227T＞G,POU1F1g.2758T＞C,GH1c.22A＞C,GH1g.1584C＞G,GHR g.-562C＞T,LTFc.172G＞A),均為首次發(fā)現(xiàn)。其中PRLR g.145227T＞G，GHR g.-562C＞T，LTFc.172G＞A3個(gè)位點(diǎn)僅發(fā)現(xiàn)于伊犁馬上，PRL g.9115T＞G，PRLg.11090A＞G，GH1c.22A＞C，GH1g.1

4、584C＞G4個(gè)位點(diǎn)僅發(fā)現(xiàn)于關(guān)中馬上，PRL g.9119C＞A位點(diǎn)為關(guān)中馬、蒙古馬共有，PRL c.210C＞T，POU1F1g.2758T＞C位點(diǎn)在三個(gè)品種上均有發(fā)現(xiàn)。全部10個(gè)SNP多態(tài)位點(diǎn)中，有3個(gè)位點(diǎn)發(fā)生在基因的CDS區(qū)域，引起錯(cuò)義突變;1個(gè)位點(diǎn)發(fā)生在基因的啟動子區(qū)域，其余6個(gè)位點(diǎn)均發(fā)生在內(nèi)含子上。
　　2.使用PCR-RFLP方法對伊犁馬上檢測到的SNP多態(tài)進(jìn)行分型統(tǒng)計(jì)，并與其120天日均產(chǎn)奶量進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。檢測到伊犁

5、馬上存在的5個(gè)不同基因的SNP位點(diǎn)中，PRLc.210C＞T和LTFc.172G＞A是發(fā)生在CDS區(qū)上的錯(cuò)義突變，PRL c.210C＞T突變導(dǎo)致PRL基因編碼蛋白第70位苯丙氨酸突變?yōu)榱涟彼?，LTFc.172G＞A突變致LTF編碼蛋白第57位精氨酸突變?yōu)橘嚢彼?GHR g.-562C＞T發(fā)生在GHR基因啟動子區(qū)域，其余位點(diǎn)均位于內(nèi)含子上。與日均產(chǎn)奶量的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示，5個(gè)不同基因的SNP位點(diǎn)中，除PRL c.210C＞T外，各位點(diǎn)不

6、同基因型的日均產(chǎn)奶量差異不顯著。PRL c.210C＞T位點(diǎn)不同基因型的日均產(chǎn)奶量差異顯著，其中CC基因型個(gè)體日均產(chǎn)奶量顯著高于CT基因型個(gè)體，CT基因型個(gè)體日均產(chǎn)奶量與TT基因型個(gè)體差異不顯著，推測C等位基因可能對伊犁馬產(chǎn)奶量性狀有正遺傳效應(yīng)。
　　3.使用雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)，檢測馬PRL、PRLR基因啟動子活性區(qū)域。檢測結(jié)果顯示，馬PRL基因上游-418～-1050bp區(qū)間為該基因的主要活性區(qū)域，其中-418～-738bp