唐古特大黃、藥用大黃和掌葉大黃的化學成分和生物活性研究.pdf

1、2010版藥典收載的正品大黃為蓼科植物掌葉大黃(Rheum palmatum L.)、唐古特大黃(Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.)或藥用大黃(Rheum officinale Baill.)的干燥根及根莖。本文在總結(jié)大黃屬植物化學成分及藥理活性研究概況的基礎(chǔ)上,開展對唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.和藥用大黃Rheum officinale Baill.的系統(tǒng)化學成

2、分研究,并對分離得到的部分成分進行了抗腫瘤活性測試,具體如下:
　　 應(yīng)用現(xiàn)代色譜技術(shù)和方法對唐古特大黃和藥用大黃的化學成分進行了系統(tǒng)的分離和純化,其中從唐古特大黃分離并鑒定了36個化合物,包括蒽醌類化學成分11個:大黃素(TGT01),大黃酚(TGT02),大黃素甲醚(TGT05),大黃酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT06),大黃酸-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT07),大黃酸(TGT08),蘆薈大黃素-1-O-

3、β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT016),蘆薈大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT017),大黃酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT27),大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT28),大黃素-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT32);苯丁酮類化合物8個:蓮花掌苷(TGT09),4-(4'-對羥基苯基)-2-丁酮-4'-O-β-D-葡萄糖苷(TGT12),4-（4'-對羥基苯基）-2-丁酮-4'-O-β-D-(6"-O-

4、對羥基反式桂皮酰基)葡萄糖苷(TGT21),4-（4'-對羥基苯基）-2-丁酮-4'-O-β-D-(2"-O-沒食酯?；?6"-O-對羥基苯乙烯醛基)葡萄糖苷(TGT22),異蓮花掌苷(TGT23),4-(4'-對羥基苯基)-2-丁酮-4'-O-β-D-(6"-O-對羥基順式桂皮酰基)葡萄糖苷(TGT35),4-(4'-O-β-D-吡喃葡萄糖-3'-甲氧基苯基)-2-丁酮(TGT31),4-(4'-O-β-D-吡喃葡萄糖-3',5'-二

5、甲氧基苯基)-2-丁酮(TGT30);鞣質(zhì)類2個:表兒茶素-3-O-沒食子酸酯(TGT03),(+)-兒茶素(TGT04);苯丙烯類3個:對羥基苯丙烯酸葡萄糖酯(TGT10),對羥基苯丙烯酸甲酯(TGT19),苯丙烯酸(TGT20);萘類3個:6-甲氧基酸模素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT11),6-甲氧基-2-乙酰基-3-甲基-1,4-萘醌-8-O-β-D-葡糖苷(TGT14),6-羥基酸模素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(T

6、GT25);二苯乙烯類2個:白黎蘆醇4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT15),白黎蘆醇4'-O-β-D-(6"-O-沒食子酰)-吡喃葡萄糖苷(TGT29);其他類7個:2,5-dimethy1-8-hydroxynaphthopyrone10-O-β-D-glucopyranoside(TGT36),2,5-二甲基-7-羥基色原酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TGT34),4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-3,5-二甲氧基苯甲酸(TG

7、T33),根皮苷(TGT26),5-(3-甲氧基-4-O-β-D-吡喃葡萄糖)-苯基-2-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮(TGT24),正二十七烷(TGT18),對羥基苯甲酸葡萄糖酯(TGT13)。其中2個為新化合物(TGT24和35),9個為首次從唐古特大黃中分離得到(TGT06,07,11,16,22,23,25,28和32),12個為首次從大黃屬中分離得到(TGT10,13,14,19-21,26,30,31,33,34和36)。從藥用

8、大黃分離并鑒定了20個化合物,包括蒽醌類8個:1-甲基-2-羧基-3,6,8-三羥基-9,10-蒽醌(YY01),ω-羥基大黃素(YY04),大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(YY08),大黃素(YY09),大黃酚(YY10),大黃素甲醚(YY11),大黃酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(YY12),大黃酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(YY14);黃酮類2個:山奈酚(YY02),3',5',5,7-四羥基二氫黃酮(YY15);萘類

9、3個:6-甲氧基酸模素8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(YY13),6-甲氧基-2-乙酰基-3-甲基-1,4-萘醌-8-O-β-D-葡萄糖苷(YY16),2-甲氧基-6-乙?；?7-甲基-胡桃醌(YY20);蒽酮類2個:10R-3-methyl-1,8,10-trihydroxy-10-β-D-glucopyranosyl-9(10H)-Anthracenone(YY17),10S-3-methyl-1,8,10-trihydroxy-10

10、-β-D-glucopyranosyl-9(10H)-Anthracenone(YY18);沒食子酸類2個:沒食子酸乙酯(YY03),沒食子酸(YY19);苯丁酮類1個:4-(4'-對羥基苯基)-2-丁酮-4'-O-β-D-葡萄糖苷(YY05);其他類2個:對羥基苯甲酸(YY06),2-(2'-羥丙基)-5-甲基-7-羥基色原酮(YY07)。其中1個新天然產(chǎn)物(YY18),9個為首次從藥用大黃中分離得到(YY01-05,13,17,19

11、和20),5個為首次從大黃屬中分離得到(YY06,07,15,16和18)。
　　 應(yīng)用超高效液相色譜與電噴霧四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC/ESI-Q-TOFMS/MS)對三種正品大黃,唐古特大黃、藥用大黃、掌葉大黃中的化學成分進行了快速識別分析;并依據(jù)離子峰的保留時間、精確分子量和二級質(zhì)譜碎片、與標準品對照及文獻報道數(shù)據(jù)對比等方法,從唐古特大黃中鑒定了53個化合物:包括11個蒽醌類、1個蒽酮類、4個芪類、14個黃烷類、11

12、個糖苷類、8個苯丁酮類、3個萘苷類和1個其他類化合物;其中16個化合物為首次從唐古特大黃中發(fā)現(xiàn),9個為首次從大黃屬中發(fā)現(xiàn)。從藥用大黃中鑒定了45個化合物:包括13個蒽醌類、4個蒽酮類、2個芪類、9個黃烷類、12個糖苷類、1個色原酮類、3個萘苷類和1個其他類化合物;其中26個為首次從藥用大黃中發(fā)現(xiàn),10個為首次從大黃屬中發(fā)現(xiàn)。從掌葉大黃中鑒定了48個化合物:包括3個蒽醌類、2個蒽酮類、1個芪類、11個黃烷類、12個糖苷類、5個苯丁酮類、1

13、個色原酮類和3個萘苷類化合物;其中28個為首次從掌葉大黃中發(fā)現(xiàn),6個為首次從大黃屬中發(fā)現(xiàn)。
　　 采用MTT法針對從大黃中分離得到的部分單體化合物進行了細胞毒活性研究。篩選結(jié)果表明萘醌類化合物YY20對細胞株Hela有較好的細胞毒作用IC50=0.055μmol/ml,對A549細胞株有一定程度的抑制作用IC50=0.098μmol/ml;環(huán)戊烯酮類化合物TGT24對Hela、A549細胞株有一定程度的抑制作用IC50=0.12

14、2,0.098μmol/ml。
　　 在分離所得化合物的基礎(chǔ)上,總結(jié)了大黃中蒽醌類和苯丁酮類成分的提取和分離方法,并對大黃中蒽醌類和苯丁酮類化合物的波譜規(guī)律進行分析、總結(jié)和探討,為這兩類成分的鑒定提供參考。
　　 以上研究結(jié)果,不僅為闡明不同基源正品大黃化學成分奠定科學依據(jù);同時,發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎且活性顯著的化合物,豐富了正品大黃化學成分的組成;為系統(tǒng)評價正品大黃多基源藥材之間的化學成分等同性、生物等效性、毒性異同、植物之間