菜籽粕化學(xué)成分和生物活性研究.pdf

1、油菜籽，為十字花科(Cruciferae)蕓薹屬(Brassica)植物油菜(Brassicacampestris L.)的種子，《本草綱目》記載為“蕓薹子”，具有活血化瘀、消腫散結(jié)、潤(rùn)腸通便、破氣行血等功效，內(nèi)服治療產(chǎn)后惡露不盡、瘀血腹痛、風(fēng)濕關(guān)節(jié)疼痛、偏頭痛、大便秘結(jié)等多種疾病，外用治療癰腫丹毒，為臨床不常用中藥。由于油菜是中國(guó)主要油料作物和蜜源作物之一，油菜籽產(chǎn)量極大，而菜籽粕作為油菜籽加工后的主要副產(chǎn)品，資源量亦很大。菜籽粕除富

2、含豐富的天然植物蛋白外，還含有硫代葡萄糖苷、植酸單寧等抗?fàn)I養(yǎng)性物質(zhì)，使其開發(fā)利用一度受到限制，長(zhǎng)期以來(lái)只能作為低價(jià)的飼料或者肥料使用，不可避免的造成了資源的巨大浪費(fèi)。因此本課題在綜述蕓薹子和菜籽粕大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，從資源回收和再利用的角度出發(fā)，系統(tǒng)分離菜籽粕中的化學(xué)成分，不僅能夠?qū)ふ椰F(xiàn)代醫(yī)藥工業(yè)值得利用的生物活性成分，為菜籽粕的深入開發(fā)提供物質(zhì)基礎(chǔ)，而且通過(guò)與中藥蕓薹子成分對(duì)比和參考，同樣能為中藥蕓薹子藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的初步研究提供理論基礎(chǔ)

3、。本文采用大孔吸附柱色譜、Sephadex LH-20、ODS柱層析、硅膠柱層析和制備HPLC，結(jié)合結(jié)晶法共分離得到了85個(gè)化合物，綜合運(yùn)用波譜學(xué)技術(shù)，并結(jié)合理化性質(zhì)分析，確證其結(jié)構(gòu)，分別鑒定為1-十一烷醇(CZP-1)、1-二十烷醇(CZP-2)、palmatic acid(CZP-3)、Campestrol(CZP-4)、Daucosterol(CZP-5)、7-羰基豆甾醇(CZP-6)、Crinosterol(CZP-7)、Ole

4、ic acid(CZP-8)、7α-羥基豆甾醇(CZP-9)、β-谷甾醇(CZP-10)、9，12-Octadecadienoic acid(Z,Z)-，2,3-dihydroxypropyl ester(CZP-11)、Trans-sinapic acid(CZP-12)、Trans-Sinapic acid methylester(CZP-13)、Trans-Sinapic acid ethylester(CZP-14)、Vinyl

5、syringol(CZP-15)、1-ethoxyethyl-3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)(CZP-16)、4-ethyl syringol(CZP-17)、(2E)-ethyl3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl) propionic(CZP-18)、Acetosyringone(CZP-19)、Syringaldehyde(CZP-20)、龍膽酸(CZP-21)、Va

6、nillic acid(CZP-22)、原兒茶酸甲酯(CZP-23)、3,5-dimethoxy-4-hydroxylbenzoic acid(CZP-24)、 protocatechuic aldehyde(CZP-25)、1-(S)-Methoxy-1-(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)ethane(CZP-26)、對(duì)羥基苯甲酸(CZP-27)、Protocatechuic acid(CZP-28)、p-

7、Hydroxybenzaldehyde(CZP-29)、 dihydrosinapic acid(CZP-30)、(6R,9S)-9-hydroxymegastigman-4-en-3-one(CZP-31)、(S)-2-sinapoly-4-pentenenitrile(CZP-32)、 Succinic acid(CZP-33)、Indole-3-acetonitrile(CZP-34)、(R)-(-)-dehydrovomifol

8、iol(CZP-35)、 Ethyl2-oxo-1,2,3,4-tetrahydroquinoline-4-carboxylate(CZP-36)、1H-indole-3-carbaldehyde(CZP-37)、4-hydroxy-1H-indole-3-carbaldehyde(CZP-38)、6-hydroxy-1H-indole-3-carboxylic acid(CZP-39)、5-乙烯基噻唑烷-2-酮(CZP-40)、5-h

9、ydroxy-4(1H)-Quinazolinone(CZP-41)、4-hydroxy-2-quinolinone(CZP-42)、5-hydroxy-quinazoline-2(1H),4(3H)-dione(CZP-43)、 Coixspirolactam C(CZP-44)、(-)-Eudesmin(CZP-45)、(+)-Magnolin(CZP-46)、 Yangambin(CZP-47)、Isolariciresinol(

10、CZP-48)、 descurainolide B(CZP-49)、1,2-di-O-sinapoyl-β-D-glucopyranose(CZP-50)、 Spicatolignan B(CZP-51)、 erythro-guaiacylglycerol-β-ferulic acid ether(CZP-52)、 Sinapic acid5-hydroxymethylfurfural ester(CZP-53)、5-Hydroxyme

11、thylfurfural(CZP-54)、 Dibutyl phthalate(CZP-55)、(6R,9R)-9-hydroxymegastigman-4-en-3-one(CZP-56)、 blumenol A(CZP-57)、3,9-dihydroxy-5,7-megastigmadien-4-one(CZP-58)、(5Z,7E)-4,4-二甲基-5-乙?；?5,7-壬二烯酸(CZP-59)、2-β-D-glucopyranos

12、ylsulfanyl-1H-indole-3-acetonitrile(CZP-60)、 Kaempferol(CZP-61)、 Kaempferol-3-β-D-glucopyranoside(CZP-62)、Isorhamnetin3-β-D-glucopyranoside(CZP-63)、 Kaempferol7-β-D-glucopyranoside(CZP-64)、6-oxo-octadecanedioic acid(CZP-

13、65)、 Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside.(CZP-66)、 Kaempferol-3,7,4'-tri-O-β-D-glucopyranoside(CZP-67)、Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl-7-O-β-D-glucopyranoside(CZP-68)、 I

14、sorhamnetin-3,7,4'-tri-β-O-glucopyranoside(CZP-69)、 Kaempferol-3-O-(2-O-sinapoyl)-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside-7-O-β-D-glucopyranoside(CZP-70)、 Kaempferol-3-O-(6-sinapoyl)-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-O-β-D-g

15、lucopyranoside-7-O-β-D-glucopyranoside(CZP-71)、 Kaempferol-4'-O-(6-sinapoyl)-β-D-glucopyranoside-3,7-di-O-β-D-glucopyranoside(CZP-72)、 Kaempferol-3-O-(3-sinapoyl)-β-D-glucopyranosyl-(1-2)-O-β-D-glucopyranoside-7-O-β-D-gl

16、ucopyranoside(CZP-73)、5,6-dihydro-6-hydroxy-2-(1',5'-dihydro-4'-(2"-hydroxyethyl)-3'5'-dimethyl-(1'H)-pyrrol-2'-one)-3-methyl-cyclopenta[b]-pyrrol-4(1H)-one(CZP-74)、β-D-frueofuranosyl-α-D-(6-sinapoyl)-glucopyranosid(CZP-

17、75)、nicotinic acid(CZP-76)、（2R*，3R*,4S*,5R*）-dimethyl2,5-bis(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl) tetrahydrothiophene-3,4-dicarb-oxylate-1-oxide(CZP-77)、(2R*，3R*,4R*)-methyl4-(bis(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)methyl)-2-methox

18、y-5-oxotetrahydrofuran-3-carboxylate(CZP-78)、1-(S)-hydroxy-1-(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl) ethane(CZP-79)、7S,8R，8'R-(-)-lariciresinol-4，4'-O-bis-β-D-glucopyranoside(CZP-80)、7S,8R，8'R-（-）-lariciresinol-4-O-β-D-glucopyra

19、noside(CZP-81)、1-methyl-6-((4-methylamio)-methyl benzoate)-2,3-diketopiperazine(CZP-82)、5-Allyloxazolidin-2-one(CZP-83)、 Adenosine(CZP-84)、 Isorhamnetin-3-O-(6-sinapoyl)-β-D-glucopy-ranosyl-(1-2)-O-β-D-glucopyranoside(CZ

20、P-85)。其中CZP-71、CZP-72、CZP-73、CZP-74、CZP-77、CZP-78、CZP-82、CZP-60、CZP-32、CZP-59為新化合物，CZP-36、CZP-83為新的天然產(chǎn)物，除化合物CZP-12、CZP-15、CZP-21、CZP-22、CZP-24、 CZP-25、CZP-27～29其余化合物均首次從菜籽粕中分離得到。
　　此外，在化學(xué)成分研究的基礎(chǔ)上，本文對(duì)其中的10個(gè)黃酮類單體化合物和7個(gè)木

21、質(zhì)素單體化合物進(jìn)行了抗氧化活性的篩選，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)各黃酮類單體具有顯著對(duì)抗細(xì)胞氧化應(yīng)激的作用，其中CZP-70、CZP-61和CZP-64的抗氧化作用最為明顯。木脂素類化合物中的個(gè)別單體組(CZP-45、CZP-46和CZP-47)能不同程度的降低細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH活性，展現(xiàn)出一定的抗氧化作用。此外，本文利用LC-MSn技術(shù)對(duì)中藥蕓薹子和菜籽粕的75％乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了分析與鑒定，分別鑒定了10種16種化學(xué)成分，為開展中藥蕓薹子