2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、弓形蟲(chóng)病(Toxoplasmosis)是由剛地弓形蟲(chóng)(Toxoplasmagondii)引起的一種重要人畜共患寄生蟲(chóng)病。該病呈世界性分布,感染范圍廣,對(duì)人畜安全構(gòu)成極大威脅。目前弓形蟲(chóng)疫苗的研究尚處于動(dòng)物試驗(yàn)階段,其安全性和有效性有待驗(yàn)證,所以推進(jìn)弓形蟲(chóng)診斷技術(shù)的研究顯得尤為重要。目前弓形蟲(chóng)病的診斷方法主要分為病原學(xué)診斷、免疫學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷,免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)作為免疫學(xué)診斷方法,以其操作簡(jiǎn)單、敏感特異、穩(wěn)定性強(qiáng)、不需要特殊設(shè)備和

2、結(jié)果判斷直觀等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于病原微生物、毒素、藥物殘留等方面的檢測(cè)。
  本試驗(yàn)采用重組弓形蟲(chóng)速殖子膜表面蛋白 SAG2(P22)作為診斷抗原,利用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金,與葡萄球菌 A蛋白(SPA)結(jié)合形成探針,采用超速離心法純化探針,對(duì)試紙條制備條件進(jìn)行篩選,組裝山羊免疫膠體金快速檢測(cè)試紙條,并對(duì)試紙條的靈敏性、特異性和可靠性進(jìn)行分析。
  本試驗(yàn)擴(kuò)增了弓形蟲(chóng)SAG2基因,構(gòu)建pGEX-4T-1-SAG2重組質(zhì)粒

3、,通過(guò)大腸桿菌表達(dá)和切膠純化,得到高純度的重組SAG2蛋白。篩選得出試紙條制備的最佳條件:20nm粒徑的膠體金在pH6.4的條件下標(biāo)記25ug·L-1SPA形成的探針結(jié)合最牢固,以四硼酸鈉稀釋探針,以BSA+NaN3+聚乙二醇10000混合液作為探針?lè)€(wěn)定劑,以Sartorius CN140型硝酸纖維膜作為載體,以1.0mg mg·L-1的重組SAG2蛋白包被檢測(cè)線,以0.9mg mg·L-1馬抗山羊IgG包被質(zhì)控線,組裝的免疫膠體金檢測(cè)

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