異體脫細胞真皮基質(zhì)對兔后鞏膜加固后組織相容性及膠原含量變化的研究.pdf

1、背景與目的:
　　后鞏膜加固術(shù)是使用加固材料加固眼球后極部鞏膜薄弱部分，特別是加固對應(yīng)黃斑區(qū)的后極部鞏膜的一種手術(shù)。它既不損傷眼內(nèi)組織結(jié)構(gòu)，安全性又好，是目前預(yù)防病理性近視進一步發(fā)展，保護現(xiàn)有視力的有效方法。后鞏膜加固術(shù)的效果和預(yù)后，與加固材料的選擇有很大關(guān)系。理想的加固材料應(yīng)當(dāng)無毒、組織相容性好，有一定的彈性和韌性，易獲取或合成，易保存與消毒，價格低、術(shù)中應(yīng)用方便等。
　　異體脫細胞真皮基質(zhì)是利用脫細胞專利技術(shù)，對人的真皮

2、進行生化處理，保留細胞外基質(zhì)成分與三維框架結(jié)構(gòu)，而將可被宿主識別、引起較強免疫排斥反應(yīng)的各種細胞成分盡量脫出。近年來在臨床上應(yīng)用較多，任何材料用于加固鞏膜，都需要良好的組織相容性。本實驗研究的是異體脫細胞真皮基質(zhì)對兔后鞏膜加固后，觀察不同時期組織相容性及膠原含量、堿性成纖維細胞生長因子的變化。
　　實驗材料及方法:
　　選用日本大耳白兔18只，雌雄各半，體重1.8-2.8kg，18只白兔隨機分成A、B、C共3組，每組6只，將

3、異體脫細胞真皮基質(zhì)修剪為25×6mm的加固條帶，同側(cè)眼使用加固條帶行后鞏膜加固，另一眼施行相同手術(shù)操作但不放置加固條帶。術(shù)后1月、2月、3月分別處死A、B、C組動物，取雙眼，先肉眼觀察，再光鏡觀察各組組織病理學(xué)特征，并用鹽酸水解法測定實驗眼鞏膜的加固區(qū)域和對照眼相應(yīng)區(qū)域羥脯氨酸(Hyp)的含量，免疫組化法觀察加固區(qū)鞏膜和對照眼相應(yīng)區(qū)鞏膜堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)含量。3組兔于室內(nèi)飼養(yǎng)，室溫20-25℃。
　　實驗結(jié)果:

4、r>　　1.肉眼觀察
　　術(shù)后1個月，加固條帶邊界清晰，平整貼附于自體鞏膜上，連接不緊密，可輕微推動。對照眼相應(yīng)區(qū)筋膜與鞏膜的連接疏松，充血程度輕。術(shù)后2個月，加固條帶與自體鞏膜的連接較前緊密、不易推動，條帶表面有纖維結(jié)締組織膜包裹。對照眼相應(yīng)區(qū)筋膜與鞏膜之間連接疏松，充血不明顯。術(shù)后3個月，加固條帶邊界稍模糊，與鞏膜連接較緊密，且條帶表面有較致密纖維結(jié)締組織膜包裹，對照眼相應(yīng)區(qū)無充血，筋膜與鞏膜連接較緊密。
　　2.病理組

5、織學(xué)檢查
　　術(shù)后1個月，受體鞏膜無明顯溶解破壞，鞏膜膠原纖維有炎癥細胞浸潤，加固條帶膠原基質(zhì)粗壯且排列規(guī)則，加固條帶周圍可見炎細胞浸潤。對照眼相應(yīng)區(qū)域鞏膜內(nèi)浸潤少量炎細胞。術(shù)后2個月，受體鞏膜膠原仍無明顯溶解破壞，鞏膜內(nèi)的成纖維細胞增多，融合區(qū)附近可見少量新生血管，加固條帶周邊膠原纖維較雜亂疏松，可見一定程度溶解破壞現(xiàn)象，對照眼相應(yīng)區(qū)鞏膜膠原排列好，浸潤的炎細胞減少。術(shù)后3個月，受體鞏膜膠原無明顯破壞，加固條帶的膠原纖維較前溶解

6、增加，融合區(qū)結(jié)締組織增生。對照眼相應(yīng)區(qū)鞏膜內(nèi)炎細胞更加減少。
　　3.羥脯氨酸(Hyp)含量檢測
　　術(shù)后各時間段對照組鞏膜加固區(qū)域的Hyp含量高于實驗組鞏膜加固區(qū)的Hyp含量，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.054，P＜0.001;t=10.027，P＜0.001;t=14.531，P＜0.001);在實驗組中，2月組鞏膜加固區(qū)的Hyp含量高于1月組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.001)。3月組的Hyp含量略低于2月組，差異無

7、統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。在對照組中，3月組Hyp含量高于1月組和2月組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.001)。
　　4.堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)含量檢測
　　在術(shù)后1月、2月和3月實驗組鞏膜加固區(qū)的bFGF含量明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.598，P=0.027;t=1.989，P=0.048;t=5.092，P=0.001）;實驗組中，3月組明顯高于1月組，差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。對