Nested PCR法擴(kuò)增16SrRNA基因檢測(cè)肺炎支原體.pdf_第1頁(yè)
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1、目的： 肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae)是兒童及成人社區(qū)獲得性呼吸道感染的最常見(jiàn)病原體。但由于缺乏特征性的臨床表現(xiàn)及檢測(cè)方法，這一感染的病原學(xué)診斷仍很困難。血清學(xué)及培養(yǎng)法耗時(shí)、不敏感、并缺乏特異性。為了增強(qiáng)這一感染源的檢測(cè)，發(fā)展了nested PCR方法。本文采用nested PCR方法，擴(kuò)增具有種屬特異性的16SrRNA基因，試圖建立一種敏感性高，特異性強(qiáng)的肺炎支原體的檢測(cè)方法。 方法：

2、 1、收集240例可疑為肺炎支原體引起的肺炎患兒的咽拭子。 2、提取DNA。 3、以16SrRNA為靶基因，設(shè)計(jì)2套引物，進(jìn)行nested PCR擴(kuò)增。 4、電泳觀察結(jié)果。 5、統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1、nested PCR法與微量顆粒凝集法相比，在檢測(cè)肺炎支原體上具有早期診斷的特點(diǎn)，且兩種檢測(cè)方法無(wú)顯著性差異。 2、nested PCR法的臨床指標(biāo)評(píng)價(jià)：準(zhǔn)確度為82.1％；敏感度為

3、76.5％；特異度為86.2％；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為80.4％；陰性預(yù)測(cè)值為83.2％。 3、nested PCR法比傳統(tǒng)的PCR法檢測(cè)肺炎支原體具有更高的敏感性。 4、nested PCR法檢測(cè)肺炎支原體，在各年齡組之間無(wú)差異，在7-9歲間出現(xiàn)高峰。 結(jié)論： 1、nested PCR法是一種快速而特異的檢測(cè)臨床標(biāo)本中肺炎支原體的可靠方法。 2、nested PCR法擴(kuò)增16SrRNA基因可以作為臨床肺炎支原體感

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