人工合成E-選擇素對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦組織一氧化氮合酶表達的影響及其機制探討.pdf

1、第一部分：人工合成E-選擇素對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響
　　目的：通過改良Zea Longa線栓法建立局灶性腦缺血再灌注損傷模型，應用人工合成E-選擇素對SD(Sprague-Dawley)大鼠進行干預，研究其對大鼠腦缺血再灌注損傷后的腦梗死體積、腦組織含水量及顯微結構的影響。
　　方法：36只雄性SD大鼠隨機分為對照組、模型組和人工合成E-選擇素治療組，每組12只。通過改良Zea Longa線栓法，即：采用頸部旁正

2、中切口，皮片保護迷走神經(jīng)，運用多聚-L-賴氨酸包被頭端的栓線等，建立SD大鼠腦缺血再灌注損傷模型。通過神經(jīng)行為學評分、TTC染色、干濕比重法、光鏡及電鏡觀察病理切片等方法，進一步了解人工合成E-選擇素對腦缺血再灌注損傷的干預作用。
　　結果：Zea Longa線栓法模型部分改良后模型制作成功率為88%。缺血區(qū)的腦組織經(jīng) TTC染色后呈蒼白色，對照組無梗死灶，治療組大鼠腦梗死體積為234±17 mm3，較模型組286±21mm3減少

3、(P<0.05)。對照組腦組織含水量79.02±0.75%；模型組82.06±0.84%；治療組腦組織含水量80.30±0.65%。病理結果提示對照組腦缺血區(qū)神經(jīng)元無損傷表現(xiàn)，模型組缺血區(qū)腦組織神經(jīng)細胞有胞漿水腫、細胞器缺乏、核質深染固縮等不同程度缺血性改變，治療組較模型組神經(jīng)細胞損傷現(xiàn)象明顯減少。
　　結論：改良后的Zea Longa線栓法模型制作更簡便，穩(wěn)定性更好，模型成功率更高。通過人工合成E-選擇素對SD大鼠進行干預能夠明

4、顯減少腦梗死體積及腦組織含水量，并通過病理切片的觀察結果，進一步證實人工合成 E-選擇素的對腦組織的保護作用。
　　第二部分：人工合成E-選擇素對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后腦組織一氧化氮合酶及血清一氧化氮含量表達的影響
　　目的：探討人工合成E-選擇素對大鼠局部腦缺血再灌注損傷中腦組織一氧化氮合酶（NOS）及血清中一氧化氮(NO)含量表達的影響及其作用機制。
　　方法：采用改良的Zea Longa線栓法建立SD大鼠局

5、灶性腦缺血再灌注損傷模型，將90只雄性SD大鼠隨機分為對照組、模型組和人工合成E-選擇素治療組，每組30只。各組大鼠在腦缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、72h，5個時間點分別提取血清標本和腦組織標本。采用硝酸鹽還原法測定血清中一氧化氮含量和免疫組化法檢測缺血區(qū)腦組織神經(jīng)型一氧化氮合酶（nNOS）、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)陽性細胞數(shù)。數(shù)據(jù)采集后應用 SPSS13.0分析軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結果：1. NO結果（1

6、）對照組NO變化無統(tǒng)計學意義。（2）模型組腦缺血2h再灌注2h~24h區(qū)間NO含量呈上升趨勢，24h時達到高峰，72h已有所降低但仍高于對照組，各時間點與對照組比較明顯增高(P<0.01)。(3)治療組血清中NO含量變化趨勢同模型組，數(shù)據(jù)統(tǒng)計結果較模型組減少(P<0.05)，較對照組增多(P<0.01)。
　　2. NOS結果（1）對照組nNOS、iNOS陽性細胞數(shù)變化無統(tǒng)計學意義。（2）模型組nNOS陽性細胞在腦缺血2h再灌注2

7、h后開始表達，12h達到高峰，24h開始降低，各時間點與對照組比較明顯增高(P<0.01)；模型組iNOS陽性細胞在腦缺血2h再灌注2h開始出現(xiàn)，并持續(xù)增多，隨著時間延長呈上升趨勢，在24h達到高峰，72h出現(xiàn)下降，各時間點與對照組比較明顯增多(P<0.01)。（3）治療組各時間點nNOS、iNOS陽性細胞數(shù)變化趨勢同模型組，但較模型組陽性細胞數(shù)減少(P<0.05)，較對照組陽性細胞數(shù)增多(P<0.01)。
　　結論：1．大鼠腦缺