溫郁金化學成分及莪術醇大鼠體內(nèi)代謝研究.pdf

1、溫郁金為姜科姜黃屬(Curcuma)多年生草本植物溫郁金Curcumawenyijin的干燥根莖，分布于我國浙江省。在中國及日本的傳統(tǒng)用藥中，溫郁金常用于治療血液循環(huán)綜合癥，即由血液循環(huán)障礙引起的炎癥，如關節(jié)痛，痛經(jīng)等。其揮發(fā)油作為抗病毒，抗腫瘤藥物收載于2005年《中華人民共和國藥典》。前期的研究結果表明，溫郁金中主要含有倍半萜類和二苯庚烷類化學成分，其中部分成分具有顯著的舒張血管作用和保肝作用。為進一步明確其生物活性成分，了解其發(fā)揮

2、藥效的物質基礎，本論文對溫郁金的干燥根莖進行了較系統(tǒng)的化學研究，利用現(xiàn)代色譜分離手段，從溫郁金中分離得到43個化合物，通過各種譜學數(shù)據(jù)(UV、NMR、MS)分析鑒定了40個化合物，包括三十三個倍半萜類化合物：其中十六個愈創(chuàng)木烷型化合物zedoalactoneD(3)、zedoalactoneE(4)、zedoalactoneF(5)、zedoalactoneH(6)．(1S，4S，5S，10R)-zedoarondiol(7)、proc

3、urcumenol(14)、zedoarondiol(15)、isozedoarondiol(16)、zedoalactoneA(17)、zedoalactoneB(18)、zedoalactoneC(19)、aerugidiol(20)、zedoarolideB(21)、curcumenol(22)、curcumol(23)、alismoxide(24)：八個吉瑪烷型化合物：curdionolideA(9)、curdionolideB

4、(10)、curdionolideC(11)、curdione(25)、(4S，5S)-(+)-germacrone-4，5-epoxide(26)、(1S，10S)，(4S，5S)-(+)-germacrone-1(10)，4-diepoxide(27)、aeruginolactone(28)、(1E，4Z)-8-hydroxy-6-oxo-germacra-1(10)，4，7(11)-trieno-12，8-lactone(29)；

5、四個桉烷型化合物：curcodione(1)、curcolide(2)、1β，4α-dihydroxy-5α，8β(H)-eudesm-7(11)Z-en-12，8-olide(32)、curcolonol(33)；二個卡拉布烷型化合物：curcumenone(30)、4S-dihydrocurcumeno-ne(31)；一個欖烷型化合物：hydroxyisogermafurenolide(34)；一個蒼耳烷型化合物：curcumadi

6、onol(12)；一個裂環(huán)吉瑪烷型化合物：6R-dehydroxylsipanolinolide(8)；二個二苯庚烷類化合物：dicurcuminol(13)、1，5-epoxy-3α-hydroxyl-1-(3，4-dihydroxy-5-metho-xyphenyl)-7-(4-hydro-xy-3-methoxyphenyl)heptane(35)；二個酚酸類衍生物ferulicacid(36)、p-hydroxycinnamic

7、acid(37)；一個黃酮類化合物5，7，4’-trihydroxy-flavanone(38)；二個甾醇及其苷類daucosterol(39)、β-sitosterol(40)。新化合物13個(化合物1-13)，其中化合物13是具有六元吡喃環(huán)結構的二苯庚烷二倍體，具有該骨架的二苯庚烷型化合物至今未見有文獻報道，化合物11是首次發(fā)現(xiàn)的吉瑪烷內(nèi)酰胺類化合物；首次從本屬植物中分離得到的化合物4個(化合物29、32、35、38)。首次從該種植

8、物中分離得到的化合物6個(化合物14、24、28、33、36、37)。上述研究結果豐富了溫郁金化學成分的結構類型，同時為進一步的生物活性研究奠定了物質基礎。 一氧化氮(NO)是在生物體內(nèi)由L-精氨酸(L-arginine，L-Arg)在一氧化氮合酶(NOS)的作用下生成的一種無機小分子自由基，是一種生物體內(nèi)重要的信使分子和神經(jīng)遞質，參與調節(jié)機體的許多生理或病理過程，如血管舒張，非特異性宿主防御反應，局部缺血再灌損傷，慢性或急性炎

9、癥反應等。研究證實在一些類型的細胞如巨噬細胞，上皮細胞，和平滑肌細胞中通過應答一些前炎癥因子如白介素-1β(IL-1β)，腫瘤壞死因子(TNF-α)和脂多糖(LPS)等的刺激可以刺激其中誘導型一氧化氮合酶(iNOS)表達而導致過量產(chǎn)生NO。論文采用Griess法考察了其中38個化合物抑制脂多糖誘導的大鼠RAW264.7巨噬細胞NO釋放活性，結果表明有6個倍半萜類化合物(化合物22，26，28，31，34，35)表現(xiàn)出很強的活性。另外，化

10、合物25表現(xiàn)出與陽性對照藥接近的抑制活性，化合物1，5，29，32較弱的抑制活性。其他化合物的IC50值均大于100，沒有表現(xiàn)出抑制活性。這些化合物對NO的抑制作用初步闡明了倍半萜類，二苯庚烷類化合物是治療關節(jié)痛，痛經(jīng)等血液循環(huán)阻礙引起的炎癥的主要活性物質。 2005版藥典規(guī)定莪術醇為臨床抗病毒、抗腫瘤用藥莪術油質量控制的指標成分。近年研究發(fā)現(xiàn)莪術醇具有與莪術油一致的藥理活性，因此，莪術醇是莪術油的主要藥效成分之一。有關莪術醇的

11、體內(nèi)代謝研究截至目前僅有一篇文獻報道，但代謝產(chǎn)物并未明確。本室已畢業(yè)的張卉博士曾經(jīng)對莪術醇大鼠體內(nèi)的代謝進行了階段性研究，分離鑒定了10種代謝產(chǎn)物。為了全面了解莪術醇體內(nèi)代謝信息，本論文繼續(xù)對莪術醇的體內(nèi)代謝進行了研究。 利用現(xiàn)代色譜分離手段，從大鼠灌胃莪術醇的尿液中共分離得到了17個莪術醇的代謝產(chǎn)物，通過波譜學等手段確定其中14個代謝產(chǎn)物的結構。分別為：10α，14，15-trihydroxy-(1αH，7βH)-guai-4

12、-en-3，8-dione(M-1)，10α-hydroxy-(1αH，7βH，11βH)-guai-8(12)，8(14)-diepoxy-4-en-3-one(M-2)，10β-hydroxy-(1αH，7βH)-guai-4-en-3，8-dioxo-12-oicacid(M-3)，(1αH，7βH)-guai-4，10(14)-dien-3，8-dioxo-12-oicacid(M-4)，5β，10β-dihydroxy-(1α

13、H，7βH，11αH)-guai-8(12)，8(14)-diepoxide(M-5)，5α，10β-dihydroxy-(1αH，7βH，11βH)-guai-8(12)，8(14)-diepoxide(M-6)，8β-hydroxy-(1αH，7βH，11βH)-guai-8(12)-epoxy-4，10(14)-dien-3-one(M-7)，10β，14-dihy-droxycurcumol(M-8)，5β，10β，14-tri

14、hydroxy-(1αH，7βH)-guai-8-one(M-9)，10β-hydroxy-(1αH，7βH，11αH)-guai-8(12)，8(14)-diepoxy-4-en-3-one(M-10)，10β-hydroxy-(1αH，7βH，11βH)-guai-8(12)，8(14)-diepoxy-4-en-3-one(M-11)，10α-hydroxy-(1αH，7βH，11αH)-guai-8(12)，8(14)-diep

15、oxy-4-en-3-one(M-12)，10β，14-dihydroxy-(1αH，7βH)-guai-4-en-3，8-dione(M-13)，10α，14-dihydroxy-(1αH，7βH)-guai-4-en-3，8-dione(M-14)。所有的代謝產(chǎn)物都是一相代謝產(chǎn)物，其中9個代謝產(chǎn)物為新化合物(M-1～M-9)，并且M-2、M-10、M-11、M-12；M-13、M-14；M-5、M-6是三對立體異構體。根據(jù)分離得到的