深綠木霉的拮抗機(jī)理、促生作用及制劑加工研究.pdf

1、本文利用己篩選的具有拮抗作用的深綠木霉菌(Trichodermaaureoviride)作為試材，進(jìn)行深綠木霉對(duì)百合疫霉菌(PhytophthoranicotianaevanBrededeHaan)抑制機(jī)理、深綠木霉制劑的制備及其對(duì)不同植物促生作用等方面的研究。 通過對(duì)峙培養(yǎng)、菌絲降解、抗生物質(zhì)測(cè)定、對(duì)扣培養(yǎng)、圓盤濾膜法、酶活性測(cè)定等一系列方法，研究深綠木霉對(duì)百合疫霉菌的多種拮抗機(jī)理，確定其具有競爭營養(yǎng)與重寄生作用，并發(fā)現(xiàn)有抗生

2、物質(zhì)產(chǎn)生。兩者在對(duì)峙培養(yǎng)60h時(shí)，生長速率比達(dá)到3.68，且在其發(fā)酵液中測(cè)定出較高的β-1，3-葡聚糖酶和幾丁質(zhì)酶的活性。另外，還觀察到深綠木霉發(fā)酵液對(duì)百合疫霉菌絲有降解作用，進(jìn)一步證實(shí)了重寄生作用的存在。 在探明拮抗機(jī)理的基礎(chǔ)上，探討液固兩相發(fā)酵的培養(yǎng)成份和條件，確定最佳培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，獲得深綠木霉制劑。先將1.0﹪(V/V)深綠木霉接種于液體麩皮培養(yǎng)基，置于全光照，25℃，pH5.0，搖瓶轉(zhuǎn)速150r/min的條件下進(jìn)行5

3、d二級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，得到1.91×1010個(gè)/ml的孢子量。再以30﹪(V/V)的孢子量接種于含水量1∶0.8的麥麩-泥土(1∶1)固料中，進(jìn)行三級(jí)固體淺盤發(fā)酵。采用前期20℃，中期24℃，后期28℃的變溫處理，固料厚度1.0cm，每12h攪拌一次，發(fā)酵10d，獲得孢子濃度為3.41×1010個(gè)/g的深綠木霉制劑。試驗(yàn)還確定深綠木霉制劑的干燥溫度在30～35℃范圍內(nèi)，干燥48h為宜(活孢率90﹪以上)，且最佳貯存組合為4℃-牛皮紙包裝，測(cè)定

4、其六個(gè)月后的孢子萌發(fā)率為32.8﹪。 研究還發(fā)現(xiàn)深綠木霉制劑對(duì)小麥、苜蓿、黃瓜的發(fā)芽和生長均有促進(jìn)作用。浸種試驗(yàn)表明，深綠木霉劑200X稀釋液均能促進(jìn)小麥、苜蓿發(fā)芽，小麥尤其明顯(發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)分別為11.8和0.437)。但其高濃度(10X、20X、50X)卻抑制發(fā)芽。而盆栽試驗(yàn)顯示，對(duì)小麥、苜蓿的出苗率，浸種法促進(jìn)效果比施入法明顯。小麥最佳浸種倍數(shù)為500，出苗率83﹪；苜蓿最佳浸種倍數(shù)為200，出苗率達(dá)87.50﹪。此