棉花生防芽孢桿菌A57、A178的抑菌機(jī)理、拮抗活性物質(zhì)及防病、促生作用.pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)拮抗細(xì)菌A57、A178進(jìn)行了種的分類地位的鑒定，研究了拮抗細(xì)菌A57、A178對(duì)棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黃萎病菌的抑菌機(jī)理，初步研究了A57、A178產(chǎn)生的拮抗物質(zhì)主要成分及拮抗物質(zhì)的理化性質(zhì)，同時(shí)初步研究了兩株菌對(duì)植物的促生作用和棉花立枯病、棉花枯萎病和棉花黃萎病的室內(nèi)防治試驗(yàn)，研究結(jié)果如下： 1 A57、A178分類地位的鑒定通過(guò)培養(yǎng)形態(tài)、生理生化特征以及16SrDNA的分子序列同源性分析，16SrDNA測(cè)

2、序結(jié)果在GeneBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行同源性比較，確定A57為短短芽孢桿菌(Brevibacillus brevs)，A178菌株為枯草芽胞桿菌(Bacillus subtilis)。 2 A57、A178的抑菌機(jī)理通過(guò)平板對(duì)峙培養(yǎng)法，發(fā)現(xiàn)A57、A178對(duì)棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黃萎病菌具有較強(qiáng)的抑菌作用，通過(guò)顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)拮抗細(xì)菌A57、A178的主要拮抗機(jī)理是通過(guò)產(chǎn)生拮抗物質(zhì)造成病原真菌菌絲體斷裂、扭曲、畸形，抑制分

3、生孢子的萌發(fā)，造成孢子畸形。 3 A57、A178抑菌物質(zhì)的提取和拮抗物質(zhì)的理化性質(zhì)采用不同濃度硫酸銨鹽沉淀法提取拮抗蛋白。以枯萎病菌作指示菌，結(jié)果表明A57、A178在70﹪的硫酸銨飽和度下粗提蛋白的拮抗活性最大，抑制率分別為23.7﹪、22.3﹪。分別對(duì)A57、A178粗提蛋白理化性質(zhì)研究，結(jié)果表明兩菌粗提蛋白對(duì)熱均穩(wěn)定，對(duì)氯仿均不敏感，對(duì)胰蛋白酶均為敏感；A57、A178拮抗活性最佳pH值為pH5-pH7，強(qiáng)酸pH3和強(qiáng)堿

4、pH9條件下仍具有部分的拮抗活性。 4 A57、A178的防病、促生作用利用A57、A178無(wú)細(xì)胞濾液不同稀釋度處理棉花種子對(duì)立枯病、枯萎病和黃萎病進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)缽試驗(yàn)，A57和A178稀釋10倍液對(duì)枯萎病的防效相當(dāng)，分別是56.8﹪，54.4﹪；A178稀釋10倍無(wú)細(xì)胞濾液對(duì)立枯病菌的防效最好，防效是63.1﹪。通過(guò)A57、A178不同稀釋度無(wú)細(xì)胞濾液培養(yǎng)棉花無(wú)菌胚，發(fā)現(xiàn)無(wú)細(xì)胞濾液對(duì)幼苗均具有一定的促生作用，其中A57稀釋10倍液對(duì)