毛竹葉活性多糖、類黃酮的中試提取及分離純化研究.pdf

1、近年來，竹葉作為新資源植物，已成為世界性的研究熱點。竹葉中含有大量的對人體有益的活性物質(zhì)，包括生物活性多糖、黃酮類化合物(又稱類黃酮)等。目前對竹葉的相關(guān)研究大多集中在對竹葉提取液、竹葉黃酮類化合物的研究報導(dǎo)，對竹葉活性多糖的研究卻寥寥無幾，同時獲得活性多糖及黃酮類化合物及廢渣再利用的工藝也從未見報導(dǎo)。更未見充分利用資源、無三廢的毛竹葉活性物質(zhì)的中試提取研究報導(dǎo)。 本論文為了毛竹葉活性多糖、黃酮類化合物的工業(yè)化生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)

2、，在小試結(jié)果的基礎(chǔ)上進(jìn)行中試提取研究，分別在常壓和真空度下改變固液比、提取次數(shù)、提取時間，比較在不同條件下毛竹葉多糖及黃酮類化合物的得率，確定了中試提取的最佳工藝條件。多糖的最佳工藝為：真空度0.05～0.06MPa，提取溫度為80℃，固液比為1：30，提取次數(shù)2次，每次提取時間為2小時，提取率為2.89％，毛竹葉粗多糖的純度為12.4％，用Sevag法脫蛋白后，純度為30.6％；黃酮類化合物的最佳工藝為：真空度0.05～0.06MPa

3、，提取溫度為63℃，70％乙醇、固液比為1：25，提取次數(shù)1次，提取時間為4小時，提取率為2.01mg/g竹葉，得到的毛竹葉粗黃酮的純度為23.1％。 為了得到毛竹葉多糖純品，使其應(yīng)用于色澤及純度要求較高的保健品及醫(yī)藥行業(yè)，脫色是必不可少的步驟。本論文采用樹脂脫色法和H2O2氧化脫色首次對毛竹葉多糖的脫色進(jìn)行了研究。樹脂脫色法采用了5種大孔樹脂，結(jié)果表明：大孔弱堿性陰離子交換樹脂D392的脫色率最高，為66.63％，多糖保留率為

4、62.18％。H2O2氧化脫色工藝研究中通過單因素試驗和正交試驗，得到其最佳脫色工藝條件：雙氧水用量50％，溫度為50℃，脫色時間為10小時，脫色率為69.1％，多糖保留率為73.5％。 為了研究中試得到的毛竹葉活性多糖的理化性質(zhì)及組成，將中試得到的毛竹葉多糖提取液經(jīng)過醇沉、脫蛋白、脫色得到BP1，DEAE-纖維素分離純化后得到BP2，經(jīng)SaphadexG-200凝膠柱鑒定純度為均一多糖，凝膠過濾法測其分子量為25136。BP1

5、紅外光譜分析結(jié)果表明具有典型的多糖特征吸收峰；BP1進(jìn)行GC分析結(jié)果表明至少由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖六種單糖組成。 為了進(jìn)一步的放大試驗及選膜提供可靠的依據(jù)，本文對毛竹葉多糖及黃酮類化合物的超濾工藝條件進(jìn)行了探索性研究。根據(jù)毛竹葉多糖的分子量分布，選用50000Dr的超濾膜對毛竹葉多糖的中試提取液進(jìn)行分離純化，超濾膜透過液中多糖濃度為0.301mg/ml，多糖的遷移率為83.38％，透過液經(jīng)紫外分光光度掃

6、描發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的截留效果良好。超濾分離純化后得到的多糖產(chǎn)品的純度為36.7％。毛竹葉多糖提取液的超濾過程中操作壓力為0.4MPa，溫度為35℃較適宜。選用8000Dr的超濾膜對毛竹葉黃酮的中試提取液進(jìn)行分離純化，得到的產(chǎn)品中黃酮的濃度為0.733mg/ml，黃酮的遷移率為86.64％，得到的黃酮產(chǎn)品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48.18％。毛竹葉黃酮提取液的超濾過程中操作壓力范圍在0.3～0.4MPa，溫度為35～40℃較適宜。 中試提取出來的毛

7、竹葉黃酮類化合物中雜質(zhì)較多，為了提高純度，需要對其進(jìn)行精制。選用5種大孔樹脂對毛竹葉黃酮類化合物進(jìn)行精制，綜合比較，AB-8樹脂比其它四種樹脂相吸附性和解吸性更好，經(jīng)AB-8樹脂精制后的毛竹葉黃酮純度達(dá)到79.4％。 研究毛竹葉黃酮的體外抗氧化作用，以期為進(jìn)一步開發(fā)毛竹葉資源提供理論依據(jù)。測定了毛竹葉黃酮對二苯代苦味酰自由基(DPPH)清除作用，同時用硫代巴比妥酸(TBA)法測定其對亞油酸的抗氧化性。體外實驗表明毛竹葉黃酮有較強(qiáng)