膽管癌組織中α-,1--腎上腺素受體表達(dá)的臨床意義及其對膽管癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的: 近來國內(nèi)外大量研究發(fā)現(xiàn)，許多腫瘤上存在著自主神經(jīng)受體特別是交感神經(jīng)受體的異常分布，結(jié)果提示去甲腎上腺素等一些經(jīng)典的神經(jīng)遞質(zhì)與腫瘤的生長和侵襲有密切關(guān)系。 我們在對膽管癌細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn)，人膽管癌細(xì)胞對神經(jīng)纖維具有親嗜性，神經(jīng)浸潤轉(zhuǎn)移是膽管癌的重要特點(diǎn)之一，也是導(dǎo)致膽管癌病人術(shù)后復(fù)發(fā)率高和預(yù)后差的重要原因。腫瘤組織發(fā)生神經(jīng)及神經(jīng)周圍浸潤的機(jī)制至今尚不明朗，過去認(rèn)為主要是神經(jīng)周圍間隙中張力較低，易于腫瘤生長；最近的研

2、究表明腫瘤微環(huán)境中的神經(jīng)遞質(zhì)以及受體的影響在腫瘤的嗜神經(jīng)性上可能起重要作用。近年來的眾多實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)p2-腎上腺素受體對卵巢癌、結(jié)腸癌及肺癌細(xì)胞的增殖及定向趨化中具有重要的影響。同時(shí)，在肝膽管系統(tǒng)腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)，NE可以通過激動α1-腎上腺素受體促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖，鑒于α1-腎上腺素受體在動脈平滑肌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)具有促細(xì)胞增殖或凋亡的能力，提示該受體在細(xì)胞生長過程中具有重要作用，因此我們研究了α1-腎上腺素受體、β2-腎上

3、腺素受體與膽管癌臨床病理因素的關(guān)聯(lián)性，并觀察了腎上腺素對膽管癌細(xì)胞增殖能力的影響，旨在證明交感神經(jīng)遞質(zhì)及其受體參與膽管癌生長和轉(zhuǎn)移的可能性。 方法: 為了驗(yàn)證我們的假想，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：首先，在膽管癌組織標(biāo)本上，應(yīng)用SABC免疫組織化學(xué)法檢測α1-腎上腺素受體、β2-腎上腺素受體在膽管癌組織的表達(dá)，并評價(jià)其臨床意義；然后用去甲腎上腺素(NE)以及非選擇性、選擇性腎上腺素受體阻滯劑酚妥拉明、哌唑嗪處理膽管癌QBC939細(xì)胞

4、，用Alamar-blue法觀察細(xì)胞的增殖變化，采用檢驗(yàn)分析觀察結(jié)果，評價(jià)去甲腎上腺素是否具有促進(jìn)膽管癌QBC939細(xì)胞增殖的能力，并初步觀察去甲腎上腺素在膽管癌細(xì)胞上的作用位點(diǎn)。 結(jié)果: 1.α1-腎上腺素受體的高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及膽管癌部位呈明顯相關(guān)，腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中α1-腎上腺素受體表達(dá)強(qiáng)陽性率(68％)明顯高于未轉(zhuǎn)移組(9.1％，P<0.05)，且α1-腎上腺素受體的表達(dá)與膽管癌的部位存在顯著相關(guān)性(P<0.

5、05)。 2.β2-腎上腺素受體在所檢測的組織標(biāo)本及人膽管癌細(xì)胞株QBC939中未見明顯陽性表達(dá)。 3.去甲腎上腺素促進(jìn)膽管癌細(xì)胞株QBC939的增殖，且隨著時(shí)間的延長，促增殖作用逐漸減弱，該作用由α1-腎上腺素受體介導(dǎo)，在非選擇性a-腎上腺素受體及選擇性α1-腎上腺素受體阻滯劑(酚妥拉明及哌唑嗪)存在的情況下可消除NE對膽管癌細(xì)胞的促增殖作用。 結(jié)論: 1.與正常膽管組織相比較，以神經(jīng)周圍組織間隙轉(zhuǎn)移為

6、獨(dú)立重要轉(zhuǎn)移途徑的膽管癌中存在著α1-腎上腺素受體的高表達(dá)，并且在發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的病例中，其強(qiáng)陽性表達(dá)率顯著高于未發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移組，提示α1-腎上腺素受體與膽管癌轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，此外β2-腎上腺素受體在膽管癌組織及膽管癌QBC939細(xì)胞無明顯表達(dá)。 2.通過膽管癌細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，去甲腎上腺素可以通過α1-腎上腺素受體促進(jìn)膽管癌細(xì)胞增殖，而α1-腎上腺素受體阻滯劑酚妥拉明及哌唑嗪單獨(dú)作用于膽管癌細(xì)胞，對細(xì)胞增殖無抑制作用，