肺泉癌SPC-A-1細(xì)胞高劑量X線照射前后MDP-1與PECAM-1的表達(dá)研究.pdf

1、肺癌是當(dāng)今世界上對(duì)人類健康產(chǎn)生重大危害的惡性腫瘤之一，也是發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。其中NSCLC占肺癌的70～80％，且首診時(shí)多為中晚期，失去手術(shù)機(jī)會(huì)，予以化療聯(lián)合放射治療為主的綜合治療，但效果不佳。研究表明，腫瘤的多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是導(dǎo)致惡性腫瘤治療失敗的重要原因之一，以多藥耐藥基因MDR-1及其編碼的蛋白p-gp介導(dǎo)的耐藥最常見(jiàn)。不僅化療會(huì)引起多藥耐藥的產(chǎn)生，放射治療同樣能引起腫瘤多藥

2、耐藥。我們前期在X射線照射的鼻咽癌研究中，發(fā)現(xiàn)MDR與血小板內(nèi)皮粘附因子有關(guān)聯(lián)，但MDR的產(chǎn)生機(jī)制尚不明確，多藥耐藥基因也在肺癌、乳腺癌、卵巢癌等中表達(dá)，我們由此推測(cè)在肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞中血小板內(nèi)皮粘附分子(Platelet Endothelial cell Adhesion Molecule-1，PECAM-1)也可能參與了MDR的產(chǎn)生。因此，研究肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞腫瘤多藥耐藥與PECAM-1基因及蛋白的表達(dá)情況及關(guān)系，為

3、進(jìn)一步研究肺癌MDR的機(jī)制提供新的方向。
　　 目的：(1)檢測(cè)經(jīng)高劑量x線照射前后肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞MDR-1及其編碼的P-gp的表達(dá)變化情況，探討X線照射與肺腺癌細(xì)胞多藥耐藥的關(guān)系。(2)檢測(cè)經(jīng)高劑量X線照射前后肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞PECAM-1及其編碼的蛋白的表達(dá)變化情況，探討X線照射與肺腺癌PECAM-1表達(dá)的關(guān)系。(3)比較MDR-1及其編碼蛋白與PECAM-1及其編碼蛋白的表達(dá)變化情況，探討兩者之間的關(guān)系。

4、
　　 方法：采用直線加速器對(duì)體外培養(yǎng)的肺腺癌SPC-A-1模擬臨床常規(guī)分割6MV X線照射，每次照射2GY每周5次，共照射20次，累積劑量40GY收集照射前后的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，用MTT法檢測(cè)順鉑作用于X線照射前后SPC-A-1細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(inhibitory concentration of drug that reduces cell survival by50％，IC50)。用RT-PCR檢測(cè)X線照射前后肺腺癌SPC

5、-A-1細(xì)胞MDR-1與PECAM-1基因的表達(dá)變化。用免疫熒光染色法檢測(cè)X線照射前后肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞P-gp與PECAM-1蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：(1)MTT法檢測(cè)x線照射SPC-A-1細(xì)胞前后IC50值分別為(0.523±0.018)μg/ml和(8.42±0.313)μ g/ml(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；(2)RT-PCR法檢測(cè)X線照射SPC-A-1細(xì)胞前后MDR-1半定量值分別為(0.22±0.

6、02)和(0.58±0.03)(P<0.05)，PECAM-1半定量值分別為(0.43±0.01)和(0.80±0.04)(P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；(3)免疫熒光染色法檢測(cè)X線照射SPC-A-1細(xì)胞前后P-gp的陽(yáng)性率分別為(25.53±2.35)和(53.42±1.73)(P<0.05)，PECAM-1的陽(yáng)性率分別為(32.28±1.43)和(65.27±4.17)(P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：X線照

7、射前肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞已存在較弱的基因(MDR-1)及其編碼的蛋白(P-gP)的表達(dá)，說(shuō)明親代的SPC-A-1細(xì)胞存在一定的原發(fā)性耐藥；照射后SPC-A-1細(xì)胞IC50值比照射前顯著增高，說(shuō)明X線照射后SPC-A-1細(xì)胞對(duì)順鉑(DDP)敏感性降低，產(chǎn)生了抵抗；X線照射后SPC-A-1細(xì)胞其基因(MDR-1)及其編碼的蛋白(P-gP)表達(dá)較照射前增高，說(shuō)明X線照射誘導(dǎo)了MDR-1及其編碼的蛋白p-gp表達(dá)，誘導(dǎo)了耐藥性的產(chǎn)生；X線照