高劑量X線照射人鼻咽癌CNE1細胞株后MDR1的表達及其機制的初步研究.pdf

1、腫瘤的多藥耐藥性(multidrug resisitance，MDR)是化療失敗的一個主要原因也是目前腫瘤治療研究的熱點。MDR是多因素共同作用的結(jié)果，目前比較肯定的腫瘤MDR產(chǎn)生的機制為多藥耐藥基因(multidrug resisitance gene 1，MDR1)及其編碼產(chǎn)物P-糖蛋白(p-glycoprotein，P-gp)的過度表達。近年來臨床研究表明，放射治療后的腫瘤患者對于化療的敏感性下降，并且一些相關(guān)研究表明在經(jīng)過X線照

2、射后的腫瘤細胞或者組織中MDR1和P-gp的表達均高于照射前[1-3]。提示放療有可能導(dǎo)致某些腫瘤產(chǎn)生多藥耐藥性，目前相關(guān)研究報道還比較少。深入研究參與調(diào)控MDR1基因表達水平的相關(guān)信號傳導(dǎo)通路，可以為腫瘤治療開辟新途徑，提供新的靶點。 目的：RT-PCR研究累積高劑量X線照射后MDR1 mRNA隨時間的表達變化趨勢。并且利用基因芯片技術(shù)，篩選累計高劑量X線照射前后CNE1細胞株中與腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)的差異表達基因，初步探討MDR

3、1表達變化的機制。 方法：選取人鼻咽癌CNE1細胞株進行體外培養(yǎng)及X線照射。照射方法為每次照射200cGy，隔天照射，共照射25次，累積劑量50Gy。分別收集人鼻咽鱗癌細胞株CNE1細胞和X線照射后得到的CNE1'/R細胞(分別于照射完成后1、7、21 、28、35、42、49天收集)，利用RT-PCR技術(shù)檢測MDR1 mRNA的表達。取其表達上調(diào)最明顯的一組細胞提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA后與Catalog No．OHS-0

4、44芯片進行雜交，篩選表達差異的基因。采用RT-PCR技術(shù)，對部分表達差異的基因進行驗證分析。 結(jié)論：X線照射前CNE1細胞中已經(jīng)有較弱的MDR1 mRNA表達，累積50GyX線照射可誘導(dǎo)CNE1細胞長時間表達MDR1 mRNA，表達強度與照射前相比差異具有顯著性。X線照射后引發(fā)CNE1細胞內(nèi)多通路多基因發(fā)生變化，它們可能相互調(diào)節(jié)、協(xié)同作用直接或者間接的誘導(dǎo)輻射后MDR的發(fā)生。累積大劑量X線照射后，CNE1細胞內(nèi)BCL-2、MM