SCID同源導入近交系615-SCID小鼠的培育及其生物學特性與初步應用的研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文SCID同源導入近交系615SCID小鼠的培育及其生物學特性與初步應用的研究姓名：朱惠芳申請學位級別：博士專業(yè)：藥理學指導教師：楊純正20031101中國醫(yī)學科學院中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文株，在我國應用廣泛。SCID小鼠為1983年Bosma等發(fā)現(xiàn)的TB淋巴細胞聯(lián)合缺乏小鼠，適合建立人源性腫瘤動物模型，但它的繁殖力低，滲漏率高，因而穩(wěn)定性不強。本研究目的是將位于SCID小鼠16號常染色體上的一對隱性免疫缺

2、陷等位基因導入到615小鼠，以建立我國自己的615小鼠T、B細胞聯(lián)合免疫缺陷動物——615SCID同源導入近交系小鼠。該動物品系將成為遺傳背景清楚，便于管理，繁育力強，生物學特性穩(wěn)定的新品系。關于將裸基因導入近交系的報道很多，但關于scid基因導入不同遺傳背景小鼠的工作則較少。我們把SCID小鼠和615小鼠的優(yōu)點結合在一起，可構建更理想的白血病模型，用于白血病及人免疫性疾病等發(fā)病原因、發(fā)病機理、治療和藥物篩選研究，這一嘗試在國內外還是首

3、例。本文在建立T、B淋巴細胞聯(lián)合免疫缺陷型615一SCID小鼠新品系的基礎上，對其生物學特性作了初步認識。利用該品系成功建立了L615小鼠白血病模型、K562和HL60人白血病小鼠體內模型和A549人肺癌細胞小鼠體內模型。實驗表明，615SCID小鼠具有615小鼠的遺傳背景，同時表現(xiàn)SCID基因的表型。該小鼠毛色棕色，胸腺缺乏皮質，僅有少量髓質，脾臟無脾小節(jié)，僅紅髓造血正常，淋巴結僅為基質細胞，外周血白細胞，3500／微升，缺乏淋巴細胞

4、，淋巴細胞比例≤30％，特別是T淋巴細胞比例顯著低于其親本的SCID小鼠。血清IgG含量≤O02mg／毫升，骨髓CFUGM形成能力與其2個親代沒有差異；對放射性照射敏感，300cGy照射劑量可以導致骨髓衰竭。根據(jù)615SCID小鼠所表現(xiàn)的免疫缺陷特征和放射敏感特征，不難看出新品系動物實現(xiàn)大規(guī)模生產后，可在國內推廣用于環(huán)境致癌物的檢測，人類造血機理的研究，免疫功能的研究，人類單克隆抗體的生產，人白血病與實體瘤模型建立，造血干細胞與外周血細

5、胞等人鼠模型的建立，抗腫瘤藥物的篩選以及其它感染性疾病的研究等。還可用于疫苗生產時傳代細胞，及作為人類基因治療的模型。615SCID小鼠的育成，為進一步認識免疫雙缺陷動物品系的生物學特性，如染色體特征、滲漏特征、生理過程及使用價值等奠定了基礎。也為發(fā)揮該品系動物免疫缺陷和易發(fā)白血病的雙重特性，用于造血與血管新生研究和血液病的發(fā)病機理、治療研究，特別是為基因治療打下基礎。關鍵詞：小鼠，615SCID，SCID，615，人肺腺癌細胞系，A5