肥胖大鼠脂肪組織基因表達譜特征的研究及差異表達基因功能的初步分析.pdf

1、目的:應(yīng)用cDNA微陣列(cDNA microarray)技術(shù),研究飲食性肥胖大鼠和NPY Y5受體反義基因治療后大鼠白色脂肪組織基因表達譜的變化,并對差異表達基因的功能進行初步分析,以探討肥胖發(fā)生的機制.方法:提取脂肪組織mRNA,標(biāo)記cDNA探針,與含有18000個人類基因片段點的cDNA微陣列(cDNA microarray)雜交,雜交膜信號掃描分析后,對差異表達基因進行生物信息學(xué)分析.結(jié)論:肥胖大鼠治療前后的脂肪組織基因表達譜均

2、有其特殊的生物學(xué)特征;運用聚類分析,不僅能推測未知基因的功能,而且能推知已知基因的新功能.為發(fā)現(xiàn)新基因及已知基因的新功能提供了線索.目的:鑒定TSG-6基因在正常和肥胖兒童脂肪組織中的表達,探討TSG-6基因在3T3-L1脂肪細胞誘導(dǎo)分化中的作用以及TSG-6基因與肥胖發(fā)生、胰島素抵抗之間的關(guān)系.方法:(1)首先采用RT-PCR技術(shù)檢測正常和肥胖兒童皮下脂肪組織中TSG-6基因的表達水平,并測序鑒定.(2)采用細胞培養(yǎng)和RT-PCR技術(shù)

3、,在成功誘導(dǎo)3T3-L1脂肪前體細胞分化成熟的基礎(chǔ)上,檢測誘導(dǎo)分化不同時段脂肪細胞中TSG-6基因的表達水平,并用TNF-α干預(yù)分化前脂肪細胞和成熟脂肪細胞,檢測TSG-6基因的表達水平.結(jié)果:(1)TSG-6基因表達于兒童的脂肪組織,且肥胖兒童皮下脂肪組織中TSG-6基因的表達水平顯著高于正常兒童.(2)隨著脂肪細胞逐漸分化成熟,TSG-6基因mRNA表達水平逐漸升高.(3)在分化前脂肪細胞和成熟脂肪細胞中,TNF-α均能在短時間內(nèi)明