肥胖相關(guān)基因在兒童皮下和網(wǎng)膜脂肪組織中的表達(dá)以及肥胖相關(guān)基因部位特異性調(diào)控的研究.pdf

1、第一部分肥胖相關(guān)基因在兒童皮下和網(wǎng)膜脂肪組織中的表達(dá)水平.目的:研究編碼11βHSD1,leptin,TNFα,resistin,adiponectin,PPARγ及凋亡抑制蛋白(cIAP2)等基因在兒童時(shí)期不同脂肪部位的表達(dá)水平以及與年齡,性別,BMI指數(shù)的關(guān)系,并與成人不同部位脂肪組織的表達(dá)水平相比較.以闡明這些基因在兒童時(shí)期表達(dá)的模式和在肥胖癥發(fā)生和發(fā)展過程中的意義.方法》(1)應(yīng)用定量的反轉(zhuǎn)錄-聚合酶聯(lián)反應(yīng)(Real time

2、RT-PCR)研究54名兒童(年齡0.3-16歲,BMI 13.1-30.5kg/m<'2>,43名正常體重,13名超重)皮下和網(wǎng)膜脂肪組織中11β HSD1,leptin,TNF,resistin,adiponectin和PPARγ基因mRNA表達(dá)水平,并分析基因表達(dá)水平與年齡,性別及人體測(cè)量學(xué)參數(shù)(BMI,腰圍或臀圍)的關(guān)系.16名成人(28-72歲,BMI 19-46kg/m<'2>)作為對(duì)照.(2)應(yīng)用半定量RT-PCR和Wes

3、tern blotting方法研究?jī)和统扇?兒童12名,BMI 13.6-21.2kg/m<'2>;成人:11名,BMI 18.0-29.9kg/m<'2>)脂肪組織中cIAP2 mRNA和蛋白表達(dá)水平.TUNEL方法測(cè)定脂肪細(xì)胞凋亡指數(shù).(4)分析基因表達(dá)水平與年齡,性別及BMI的關(guān)系.結(jié)論:與成人相類似,兒童時(shí)期11β HSD1,leptin,cIAP2基因的表達(dá)也呈現(xiàn)部位特異性.網(wǎng)膜脂肪組織較高的11 β HSD1表達(dá)可能涉及兒

4、童生長(zhǎng)過程中內(nèi)臟脂肪組織的分化和脂質(zhì)的積聚.超重兒童脂肪組織中11β HSD1,leptin及adiponectin表達(dá)的變化提示與胰島素抵抗相關(guān)的危險(xiǎn)因子出現(xiàn)在生命早期.PPARγ可能介導(dǎo)了體內(nèi)adiponectin的調(diào)控.第二部分糖皮質(zhì)激素和PPARγ激動(dòng)劑介導(dǎo)的皮下和網(wǎng)膜脂肪組織基因表達(dá)的調(diào)控.目的:觀察糖皮質(zhì)激素(dexamithasone,DEX)和PPARγ激動(dòng)劑(Troglitzone,TGZ)對(duì)人類不同部位脂肪組織11β

5、 HSD1,adiponectin及l(fā)eptin基因表達(dá)的調(diào)節(jié)作用,進(jìn)一步明確內(nèi)臟性肥胖癥產(chǎn)生胰島素抵抗的分子機(jī)制.方法:(1)應(yīng)用體外脂肪組織培養(yǎng)技術(shù),分別預(yù)予DEX,TGZ或兩者結(jié)合刺激皮下和網(wǎng)膜脂肪組織24小時(shí).觀察兩部位脂肪組織中11HSD1,adiponectin及l(fā)eptin mRNA表達(dá)水平.(2)ELISA方法檢測(cè)培養(yǎng)上清adiponectin的分泌水平.結(jié)論:DEX和TZD對(duì)肥胖相關(guān)基因11β HSD1,adipone