桉葉素對大鼠脊髓膠狀質(zhì)神經(jīng)元自發(fā)興奮性傳遞的影響.pdf

1、目的：TRP(transient receptor potential)通道是一類廣泛存在神經(jīng)系統(tǒng)的跨膜蛋白質(zhì)，是一種非選擇性陽離子通道。TRP通道家族包含七種亞族，其中多種TRP通道參與疼痛信號(hào)的傳遞。脊髓背角膠狀質(zhì)(SG)含有豐富且經(jīng)典的遞質(zhì)及其受體，是傷害性信息傳入的第一站，是脊髓中神經(jīng)結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成最復(fù)雜的區(qū)域，是疼痛調(diào)制的關(guān)鍵部位。盡管TRP通道在脊髓SG神經(jīng)元痛覺傳遞的過程中發(fā)揮著重要的作用；但其作用尚不明確。TRP通道可被

2、多種植物源性化學(xué)物質(zhì)激活，如辣椒素和異硫氰酸鹽等。桉葉素存在于多種植物精油中，最近研究報(bào)道它具有鎮(zhèn)痛的作用，但其作用機(jī)制尚不清楚。本研究采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，觀察1,4-桉葉素和1,8-桉葉素對脊髓膠狀質(zhì)神經(jīng)元谷氨酸能自發(fā)興奮性傳遞的影響，探討其作用機(jī)制是否與DRG神經(jīng)元上的TRP通道有關(guān)。
　　 方法：雄性SD大鼠(6-8周)，腹腔注射烏拉坦(1.2 g/kg)麻醉后，行腰骶部椎板切除術(shù)。20 min后，取出腰骶部脊髓(L1-

3、S3)，利用振動(dòng)切片機(jī)切取650-700μm厚的脊髓切片，放入記錄槽內(nèi)的尼龍網(wǎng)上。人工腦脊液(Krebs)灌流1h后，盲法全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄SG神經(jīng)元的sEPSC。將1，4-桉葉素、1，8-桉葉素、(-)薄荷醇、辣椒素、TRPV1通道抑制劑抗辣椒素和TRPA1通道抑制劑HC-030031分別灌注記錄槽。
　　 結(jié)果：固定電位保持在-70 mV，0.05-7 mM1，8-桉葉素灌注3 min，sEPSC的頻率增加呈劑量依賴性，E

4、C50為2.5 mM(Hill系數(shù)為2.0)，波幅無明顯改變。0.1-0.7 mM1，4-桉葉素灌注3 min，sEPSC的頻率增加呈劑量依賴性，EC50為0.18mM(Hill系數(shù)為7.9)，伴隨波幅輕度增加。0.5 mM1，4-桉葉素(含有1，8-桉葉素植物中的一種微量提取物)灌注3 min，sEPSC的頻率增加程度較1，8-桉葉素高，伴隨波幅輕微增加。桉葉素引起sEPSC頻率增加的效果是可重復(fù)的，20 min后再次用藥有同化作用。

5、桉葉素對自發(fā)興奮性傳遞的促進(jìn)作用不能被TRPV1通道抑制劑抗辣椒素阻斷，也不影響辣椒素的作用。但是，桉葉素的作用可被TRPA1通道抑制劑HC-030031抑制。和(-)薄荷醇相比，1，8-桉葉素對sEPSC頻率的增加率遠(yuǎn)大于預(yù)期的其通過激活TRPM8而產(chǎn)生的影響。在部分細(xì)胞中，桉葉素可引起內(nèi)向電流。
　　 結(jié)論：桉葉素通過激活神經(jīng)元的TRPA1通道而不是TRPV1通道，引起脊髓SG神經(jīng)元自發(fā)性左旋谷氨酸釋放增加。1，4-桉葉素的