低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)新西蘭兔白細(xì)胞減少癥的影響研究.pdf

1、目前惡性腫瘤的發(fā)病率越來(lái)越高，放療和化療是其常見(jiàn)的治療方法之一，但這兩種方法在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)對(duì)其他正常的組織器官亦有一定的損傷，因而可能導(dǎo)致一系列的不良反應(yīng)的發(fā)生，骨髓抑制是其常見(jiàn)的不良反應(yīng)?，F(xiàn)有的抗腫瘤藥物大多具有不同程度的骨髓抑制，首先表現(xiàn)為白細(xì)胞總數(shù)(total white blood cells，WBC)減少和中性粒細(xì)胞減少，其次出現(xiàn)血小板(Platelets，PLT)減少和出血傾向，嚴(yán)重者可出現(xiàn)白細(xì)胞、紅細(xì)胞(red bl

2、ood cell，RBC)和PLT減少。
　　目前針對(duì)抗腫瘤治療引起的白細(xì)胞減少主要使用升白細(xì)胞藥物治療，其中最常見(jiàn)的是粒細(xì)胞集落刺激因子(Cranulocyte-colony stimu-lating factor，CSF)，雖然CSF可對(duì)大部分白細(xì)胞減少癥患者有效，但仍然有部分是無(wú)效的，還有一定的不良反應(yīng)，且費(fèi)用昂貴。因此，需要尋找到更有效或/和副作用更小或/和便宜的治療方法。
　　近年來(lái)，低強(qiáng)度脈沖超聲（Low-Int

3、ensity Pulsed Ultrasound，IPUS）作為一種安全的物理治療方法，逐漸應(yīng)用到臨床的治療上，如促進(jìn)骨與軟組織創(chuàng)傷的愈合。其發(fā)射方式為脈沖式，其劑量可低至30mw/cm2以下，操作簡(jiǎn)便、安全有效且費(fèi)用低廉。研究發(fā)現(xiàn)LIPUS可促進(jìn)多種細(xì)胞的增殖，包括成纖維細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。
　　我們前期研究已篩選出后續(xù)實(shí)驗(yàn)的適宜LIPUS參數(shù)，并初步證實(shí)經(jīng)過(guò)LIPUS輻照后，正常骨髓有核細(xì)胞的增殖速度加快，細(xì)胞數(shù)目明顯增多。

4、而骨髓有核細(xì)胞的增殖與WBC的增加密切相關(guān)。因此本課題在其實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上繼續(xù)深入研究，參考建立大鼠和小鼠白細(xì)胞減少癥模型的方法，采用環(huán)磷酰胺建立新西蘭兔白細(xì)胞減少癥模型，采用LIPUS對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行治療，觀察能否升高WBC，探討LIPUS用于治療白細(xì)胞減少癥的可能性。
　　目的：
　　1.測(cè)定新西蘭兔血常規(guī)的正常值，采用環(huán)磷酰胺建立新西蘭兔白細(xì)胞減少癥模型;
　　2.對(duì)比觀察使用CSF和短期（7天）使用LIPUS輻照后，

5、新西蘭兔的一般情況及其血常規(guī)的變化;
　　3.觀察較長(zhǎng)時(shí)間（40天）使用LIPUS后，新西蘭兔的一般情況及其血常規(guī)的變化。
　　方法：
　　1.對(duì)150只新西蘭兔耳緣靜脈注射環(huán)磷酰胺，劑量為50mg/kg，連續(xù)注射4天。注射期間及注射后，于兔耳中動(dòng)脈抽取0.5-1ml血液，進(jìn)行血常規(guī)檢查。
　　2.將60只白細(xì)胞減少癥模型兔隨機(jī)分為三組，分別為L(zhǎng)IPUS組、CSF組和對(duì)照組，每組20只。LIPUS組采用已篩選出的

6、適宜參數(shù)0.6W/cm2，20min進(jìn)行輻照，連續(xù)輻照7天;CSF組則按5μg/kg的劑量于兔耳緣靜脈注射重組粒細(xì)胞刺激因子，連續(xù)7天;對(duì)照組則既不進(jìn)行LIPUS輻照，也不進(jìn)行CSF注射。
　　3.將60只白細(xì)胞減少癥模型兔隨機(jī)分為2組，LIPUS組和對(duì)照組，每組30只。LIPUS組連續(xù)輻照40天;對(duì)照組則不進(jìn)行輻照。
　　結(jié)果：
　　1.注射環(huán)磷酰胺后新西蘭兔出現(xiàn)腹瀉等不良反應(yīng)，甚至出現(xiàn)死亡。在觀察期間，共有95只發(fā)

7、生腹瀉，腹瀉率為63.33％;30只死亡，死亡率為20％。WBC于注射環(huán)磷酰胺24小時(shí)后開(kāi)始減少，至第4天降至低值（2.37±1.03×109/L），為給藥前WBC的20％;至22天時(shí)，仍處于較低水平（4.90±0.54×109/L），為給藥前WBC的42％，第4天和第22天的WBC與給藥前相比，WBC下降值均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　2.LIPUS組和CSF組的模型兔的腹瀉情況在處理后均開(kāi)始好轉(zhuǎn)，LIPUS組的腹瀉和

8、死亡主要發(fā)生在開(kāi)始輻照時(shí)，至第7天時(shí)已無(wú)腹瀉和死亡的發(fā)生，共有11只模型兔發(fā)生腹瀉，腹瀉率為55％;死亡2只，死亡率為10％。CSF組的腹瀉和死亡主要發(fā)生在停止使用CSF后，共有12只模型兔發(fā)生腹瀉，腹瀉率為60％;死亡5只，死亡率為25％。兩組間的腹瀉率和死亡率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。對(duì)照組的兔腹瀉未見(jiàn)好轉(zhuǎn)，共有17只模型兔發(fā)生腹瀉、死亡14只，腹瀉率為85％，死亡率為70％。LIPUS組的腹瀉率和死亡率與對(duì)照組相比，均低于對(duì)

9、照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05); CSF組與對(duì)照組相比，腹瀉率低于對(duì)照組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;死亡率低于對(duì)照組，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　LIPUS組的WBC于第1天輻照后開(kāi)始上升，于第8天（輻照7天后）輻照時(shí)達(dá)到高峰，停止輻照后下降，但仍維持在正常值范圍內(nèi)，至22天時(shí)仍在正常值范圍內(nèi);CSF組WBC于第一天注射CSF后開(kāi)始上升，于第4天注射后達(dá)到高峰，第5天注射后開(kāi)始下降，于第8天時(shí)降至正常值以下;對(duì)照組的WBC在

10、第5天開(kāi)始升高，第8天升至正常值范圍內(nèi)，第14天后降至正常值以下。LIPUS組的WBC與CSF組相比，第2-17天時(shí)的WBC具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，其中第2-5天時(shí)，LIPUS組的WBC低于CSF組，第8-17天時(shí)，LIPUS組的WBC高于CSF組;LIPUS組WBC與對(duì)照組相比，第2-14天時(shí)的WBC具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，LIPUS組的WBC高于對(duì)照組;CSF組的WBC與對(duì)照組相比，第2-5天的WBC具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

11、p＜0.05)，CSF組的WBC高于對(duì)照組。
　　LIPUS組的PLT于第1天輻照后升至正常值以上，停止輻照后降至正常值范圍內(nèi)，CSF組的PLT于第1天注射后升高，但隨即下降，第5天注射時(shí)已降至正常值范圍內(nèi)，對(duì)照組的PLT一直在正常值范圍內(nèi)波動(dòng)。雖然LIPUS組PLT高于CSF組和對(duì)照組，但3組間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　LIPUS組、CSF組和對(duì)照組的RBC和HGB均持續(xù)下降，LIPUS組與CSF組相比，LIPUS組與對(duì)照組相

12、比， CSF組與對(duì)照組，三組的RBC和HGB均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.延長(zhǎng)LIPUS的輻照天數(shù)，LIPUS組的WBC于輻照1天后即開(kāi)始上升，于輻照7天后達(dá)到高峰，隨后降至正常值范圍內(nèi)，至40天時(shí)仍在正常值范圍內(nèi)。第4-27天時(shí)，LIPUS組與對(duì)照組相比， LIPUS組的WBC高于對(duì)照組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　LIPUS組模型兔于第4天時(shí)已無(wú)腹瀉發(fā)生，共腹瀉6只，未出現(xiàn)死亡，腹瀉率為20％，死亡率為0％。而對(duì)