MMP-9、TIMP-1及Ⅳ型膠原mRNA和蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：探討結(jié)直腸癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinases-9，MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(Tissue inhibitors of metalloproteinase-1，TIMP-1)及Ⅳ型膠原(Type Ⅳ collagen)的mRNA和蛋白的表達(dá)情況，明確其與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法：收集50例結(jié)直腸癌組織，其相應(yīng)的癌旁組織和正常粘膜組織各50例作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。采用逆轉(zhuǎn)錄．

2、多聚酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)法及免疫組織化學(xué)S-P兩步法(Immunohistochemistry S-P)對(duì)所收集標(biāo)本中MMP-9、TIMP-1及Ⅳ型膠原的表達(dá)狀況進(jìn)行檢測(cè)，并結(jié)合I臨床病理因素進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果： (1)癌組織中MMP-9 mRNA陽性表達(dá)率為78％，MMP-9蛋白陽性表達(dá)率為72％，與癌旁及正常粘膜者比

3、較均有顯著差異(P<0.05)。兩者均與腫瘤浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)(P<0.05)，與患者年齡、性別、分化程度無明顯相關(guān)(P>0.05)。 (2)癌組織中TIMP-1 mRNA陽性表達(dá)率為54％，TIMP-1蛋白陽性表達(dá)率為50％，與癌旁及正常粘膜者比較均有顯著差異(P<0.05)。兩者均與腫瘤分化程度、浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)(P<0.05)，與患者年齡、性別無明顯相關(guān)(P>0.05)。 (3)癌

4、組織中Ⅳ型膠原mRNA和Ⅳ型膠原蛋白均呈低表達(dá)，陽性率分別為30％和24％，與癌旁及正常粘膜者比較均有顯著差異(P<0.05)。兩者均與腫瘤浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)(P<0.05)，與患者年齡、性別、分化程度無明顯相關(guān)(P>0.05)。 (4)MMP-9 mRNA表達(dá)與 TIMP-1 mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.382，P=0.006)；MMP-9 mRNA表達(dá)與Ⅳ型膠原mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.706，P=0

5、.000)；TIMP-1 mRNA表達(dá)與Ⅳ型膠原mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.359，P=0.010)。 (5)應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)MMP-9、TIMP-1及Ⅳ型膠原中mRNA的表達(dá)和應(yīng)用免疫組化檢測(cè)三者中蛋白的表達(dá)，其結(jié)果是相似的。 結(jié)論： (1)RT-PCR檢測(cè)組織中MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA和Ⅳ型膠原mRNA陽性表達(dá)的結(jié)果與免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)MMP-9、TIMP-1和Ⅳ型膠原蛋白陽

6、性表達(dá)的結(jié)果基本一致，都可作為組織中三者陽性表達(dá)的檢測(cè)方法。 (2)MMP-9是水解Ⅳ型膠原的主要蛋白酶，在結(jié)直腸癌的侵襲與轉(zhuǎn)移過程中起著重要作用。隨著結(jié)直腸癌浸潤深度越深、臨床分期越晚或伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，MMP-9表達(dá)陽性率越高。提示MMP-9可能主要作用于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移階段。 (3)TIMP-1在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)明顯增高。在惡性度較低或分化程度較高的腫瘤組織中TIMP-1的陽性率明顯較高。MMP-9/TIMP-1的失衡，