豬離體支氣管溫缺血實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、肺移植已經(jīng)成為目前治療許多終末期肺部疾病的有效手段,移植給患者的肺即"供肺",來自肺外原因死亡的病人.但是肺源的短缺嚴(yán)重限制了肺移植工作的開展.由于供體肺的嚴(yán)重缺乏,一個(gè)受體從決定可以接受肺移植開始,通常需要等待1.5-3年時(shí)間才能有機(jī)會(huì)進(jìn)行肺移植的嘗試,大約有10-15﹪的患者在痛苦的等待中遺憾的死去.為了解決這一矛盾,人們在進(jìn)行了不懈的嘗試后,終于將目光投向了."無心跳供體"肺(即"尸體"肺).如果"無心跳供體"肺可以安全的應(yīng)用于肺

2、移植將會(huì)在很大程度上緩解供體肺缺乏問題. 此外,"無心跳供體"肺的應(yīng)用更加適合于我國的國情.西方國家已經(jīng)確定了"腦死亡"法,當(dāng)病人進(jìn)入不可逆昏迷,確定腦死亡后,就在人工維持呼吸及循環(huán)的情況下,摘取臟器供移植使用,這樣的器官有良好的活力和較正常的生理功能,移植效果好.但是,我國至今尚未制定腦死亡法,所以要在心跳和呼吸停止后才可以采取供肺,因此,對(duì)于"無心跳供體"肺功能的研究顯得尤為重要. "無心跳供體"肺應(yīng)用性的提出,起初

3、受到了許多的質(zhì)疑,人們普遍認(rèn)為心跳停止后的肺臟是一種"休克肺",不能用作肺移植的供體.但是1986年,Lechner等用從尸體中獲得的肺上皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),獲得了成功.這一結(jié)果提示:血液循環(huán)停止后,完整肺功能的可恢復(fù)性將提供足夠的氣體交換,足以使肺移植取得成功.這一假設(shè)基于如下觀點(diǎn):肺的細(xì)胞呼吸并不完全依賴于血液灌注,而主要是直接通過氣體界面,并且通過這一氣體界面進(jìn)行氣體交換的主要過程是完全被動(dòng)的. 隨后,越來越多的研究者開始對(duì)"

4、無心跳供體"肺進(jìn)行深入的研究,以闡明溫缺血對(duì)肺移植物的影響,從而改善對(duì)移植肺的保護(hù). 本課題主要研究溫缺血1h對(duì)支氣管功能的影響,從而為"無心跳供體"肺移植的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù).材料與方法瑞典家豬16頭,雌雄不拘,體重26.9±1.2kg(25.28kg).麻醉及全身肝素化后,側(cè)開胸取出一側(cè)全肺灌注4℃ LPD液,呼氣末切取小塊周邊肺組織置入4℃、充有氧氣的Krebs溶液中,手術(shù)顯微鏡下采用不觸及支氣管的游離技術(shù),游離并取出內(nèi)

5、徑約1.5mm的支氣管段,截至1.5mm長的無分支的支氣管環(huán).將從每頭豬身上所取的支氣管環(huán)隨機(jī)分配到以下兩組:有心跳供體組(HBD組)和溫缺血一小時(shí)后的無心跳供體組(NHBD-1h組).同時(shí),根據(jù)誘導(dǎo)上皮依賴性舒張(epitheliumdependent relaxation,:EpiDR)與否,將每組進(jìn)一步分為兩個(gè)亞組(分別用A和B表示),A亞組為加入花生四烯酸鈉誘導(dǎo):EpiDR組,B亞組不加入花生四烯酸鈉作為組內(nèi)空白對(duì)照,以證實(shí)無自

6、發(fā)性氣管舒張反應(yīng)發(fā)生.乙酰膽堿(acetylcholine)和罌粟堿(paraverine)分別加入器官浴槽用來測定平滑肌的收縮和舒張功能,花生四烯酸鈉(arachidonic acid sodium salt)用來測定支氣管上皮功能.結(jié)果綜合高鉀Krebs溶液(5.69±0.16 VS 5.81±0.14)和乙酰膽堿(5.10±0.11VS 5.18±0.07)誘導(dǎo)的肺支氣管收縮,NHBD組平滑肌收縮功能與HBD組的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

7、(P>0.05);NHBD組EpiDR與HBD組對(duì)比(1.23±0.07 VS 1.26±0.05)也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),提示支氣管上皮功能完好;同時(shí),平滑肌均能對(duì)罌粟堿表現(xiàn)出完全的舒張;此外,實(shí)驗(yàn)過程中B亞組支氣管均無自發(fā)性舒張發(fā)生.提示:經(jīng)過溫缺血1h后的NHBD組與HBD組的肺支氣管功能無明顯差異.結(jié)論溫缺血1h后,無論支氣管平滑肌的收縮還是舒張功能均保存完好,肺支氣管的上皮依賴性和非依賴性調(diào)節(jié)均和非缺血肺支氣管沒有明顯