人解整合素樣金屬蛋白酶22在前列腺癌中的表達(dá)及其意義探討.pdf

1、在發(fā)達(dá)國家，前列腺癌是臨床上排名第二的常見腫瘤，同時(shí)也是男性腫瘤死亡率排第三的疾病。我國前列腺癌的發(fā)病率雖明顯低于歐美國家，但近年隨著人均壽命的延長、膳食結(jié)構(gòu)的改變和診斷技術(shù)的提高，發(fā)病率有明顯增高的趨勢(shì)，在男性泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中發(fā)病率躍居第三位。前列腺癌的發(fā)病機(jī)制未明，但是其局部微環(huán)境理應(yīng)有重要作用，ADAM分子是近年新發(fā)現(xiàn)的具有重要作用的金屬蛋白酶分子，因此，本課題擬探討其中一種分子ADAM22在前列腺癌中的表達(dá)和意義。

2、　　目的：探討ADAM22在前列腺癌中的分布和意義。制備其特異性抗體。判斷細(xì)胞因子對(duì)其調(diào)節(jié)及分子機(jī)理。其對(duì)腫瘤凋亡的影響，從而從新的角度探討前列腺癌的發(fā)病及病理情況，為前列腺癌的診治和預(yù)后建立新的評(píng)判角度。
　　方法：RT-PCR法克隆ADAM22cDNA，將其胞膜外區(qū)插入載體，誘導(dǎo)表達(dá)并純化，免疫小鼠制備單克隆抗體并利用流式細(xì)胞術(shù)、westernblot和免疫組織化學(xué)進(jìn)行鑒定。探討TNF-α誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞ADAM22轉(zhuǎn)錄，表達(dá)

3、及其相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。觀察重組ADAM22對(duì)重組Fas的水解作用以及抗體對(duì)這種作用的封閉，將ADAM22與Fas基因共轉(zhuǎn)染或進(jìn)行基因干涉，判斷其對(duì)Fas誘導(dǎo)凋亡的影響。
　　結(jié)果：成功克隆ADAM22cDNA并表達(dá)融合蛋白。獲得3株ADAM22特異性單克隆抗體，其中一株能夠用于流式鑒定，一株能夠用于免疫組織化學(xué)鑒定。ADAM22在前列腺癌中陽性分布，主要集中在腺樣上皮和間質(zhì)細(xì)胞中。TNF-α通過活化p38MAPK和NF-κB而促進(jìn)