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文檔簡介
1、目的:采用手術(shù)方法建立大鼠膝關(guān)節(jié)骨軟骨缺損及表面軟骨缺損動物模型,通過檢測膠原表達變化探討不同關(guān)節(jié)軟骨缺損自我修復(fù)的能力,通過檢測基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)在損傷后關(guān)節(jié)軟骨組織中的表達變化,探討損傷導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨退變的病理學(xué)機制。 方法: 取雌性SD大鼠48只,隨機分成A、B、C三組,A組18只,在雙膝關(guān)節(jié)股骨髕面制作骨軟骨缺損直徑3.0mm,深度3.0mm,以缺損底部出現(xiàn)滲
2、血為宜;B組18只,在雙膝關(guān)節(jié)股骨髁間制作表面軟骨缺損寬度0.3mm,深度0.3mm,缺損底部無滲血,不穿透軟骨下骨板;C組12只,雙膝關(guān)節(jié)只做關(guān)節(jié)囊切開,不做任何處置直接縫合,為假手術(shù)對照組。分別于術(shù)后4、8、12W三個時間點取材,實驗組每個時間點處死6只大鼠,對照組每個時間點處死4只大鼠。取雙膝關(guān)節(jié)原切口,充分顯露股骨遠端關(guān)節(jié)面,于股骨髁上垂直于骨干截下股骨遠端。將標本放置于固定脫鈣后制作石蠟切片,行HE、甲苯胺蘭染色、Ⅰ型膠原、Ⅱ
3、型膠原、MMP-2、MMP-3、MMP-9免疫組化染色。 結(jié)果: A組術(shù)后4W缺損中有少量新生組織生成,8W及12W可見到纖維組織填充,三個時間點修復(fù)組織細胞外基質(zhì)I型膠原免疫組化染色陽性,Ⅱ型膠原免疫組化染色陰性,關(guān)節(jié)軟骨組織中MMP-2、MMP-3、MMP-9表達增高(與C組比較有顯著性差異,P<0.05)。B組表面軟骨缺損4W及8W未見修復(fù)跡象,12W可見微量纖維組織填充,其細胞外基質(zhì)I型膠原免疫組化染色陽性,Ⅱ型
4、膠原免疫組化染色陰性,B組關(guān)節(jié)軟骨組織術(shù)后三個時間點MMP-2、MMP-3、MMP-9表達均增高(與C組比較有顯著性差異,P<0.05)。C組三個時間點均為正常關(guān)節(jié)軟骨組織,Ⅰ型膠原免疫組化染色陰性,Ⅱ型膠原免疫組化染色陽性,MMP-2、MMP-3、MMP-9低度表達,無形態(tài)學(xué)異常改變。 結(jié)論: 大鼠骨軟骨缺損在間充質(zhì)細胞的參與下以纖維形式進行自我修復(fù),修復(fù)組織無法恢復(fù)正常關(guān)節(jié)面的平整,是非透明軟骨組織。表面關(guān)節(jié)軟骨缺損
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