去勢大鼠脛骨形態(tài)計量學改變及骨髓基質(zhì)細胞IL-1、IL-6、TNF-α、TGF-βmRNA的表達.pdf

1、目的:該文通過建立骨質(zhì)疏松模型,觀察去勢后隨時間的延長,大鼠脛骨形態(tài)計量學改變,體外培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)IL-1,IL-6,TGF-β,TNF-α mRNA表達以及上清液中IL-1 β和NO濃度改變,探討以下問題:(1)雌激素缺乏對原發(fā)性骨質(zhì)疏松的影響,骨質(zhì)疏松發(fā)病過程中,骨吸收參數(shù)與骨形成參數(shù)的變化(2)體外培養(yǎng)的BMSCs能否表達IL-1,IL-6,TGF-β和TNF-α mRNA(3)絕經(jīng)年限對BMSCs IL-1,I

2、L-6,TGF-β和TNF-α mRNA表達的影響(4)NO濃度改變與骨質(zhì)疏松之間的關(guān)系方法將56只4月齡雌性Wistar大鼠隨機分為6組:假切1月組(Ⅰ組),假切4月組(Ⅱ組);去勢1月組(Ⅲ組),去勢4月組(Ⅳ組),去勢7月組(Ⅴ組),去勢12月組(Ⅵ組),每組8只.各組大鼠分別于實驗末斷頸處死,取左側(cè)脛骨,新鮮分離骨髓細胞,靜置貼壁法體外培養(yǎng)BMSCs 13天后,吸取上清液.采用原位雜交(ISH)方法分析IL-1,IL-6,TGF

3、-β和TNF-α在去勢大鼠不同時期BMSCs表達情況;酶聯(lián)免疫吸附(ELISH)法測定上清液中IL-1β濃度;NO濃度含量檢測采用硝酸還原酶法.取右側(cè)脛骨制備不脫鈣的骨切片,甲苯胺藍染色后,行骨組織形態(tài)計量學觀察.結(jié)論:(1)去勢后隨時間的延長,大鼠骨質(zhì)丟失的比例和數(shù)量越來越嚴重,由雌激素缺乏引起的骨質(zhì)疏松的發(fā)病過程中,破骨細胞數(shù)、吸收表面等骨的吸收參數(shù)增加,但類骨質(zhì)表面、成骨細胞表面等成骨參數(shù)降低,引起骨的形成與吸收脫偶聯(lián)而導致骨質(zhì)疏