鎳污染地區(qū)大氣細(xì)顆粒物對(duì)大鼠氧化損傷及免疫毒性的研究.pdf

1、目的： 分析比較鎳污染程度不同的兩地區(qū)環(huán)境空氣質(zhì)量以及PM2.5中金屬元素的含量；通過PM2.5對(duì)大鼠呼吸系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)氧化損傷及免疫損傷的毒理學(xué)研究，探討PM2.5成分毒性的差異以及其導(dǎo)致機(jī)體損傷的易感性因素和機(jī)制。 方法： 1.選擇某鎳污染地區(qū)及對(duì)照地區(qū)，監(jiān)測(cè)兩地環(huán)境空氣質(zhì)量、采集PM2.5并進(jìn)行鎳及其他金屬元素濃度分析。 2.將42只成年雄性SPF級(jí)Wistar大鼠隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組、

2、鎳污染區(qū)組和對(duì)照區(qū)組，每個(gè)區(qū)組又分為低(1.6 mg/kg)、中(8.0 mg/kg)、高(40.0mg/kg)劑量組，每劑量組6只。一次性氣管滴注染毒PM2.5懸液，24 h后處死大鼠。采用單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(SCGE)觀察大鼠肺泡上皮細(xì)胞DNA的損傷、白色念珠菌吞噬實(shí)驗(yàn)觀察肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的變化，同時(shí)檢測(cè)肺泡灌洗液中生化成分的活性來研究PM2.5對(duì)大鼠呼吸系統(tǒng)氧化及免疫損傷情況；采用E-玫瑰花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)進(jìn)行淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT法

3、檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖活性來研究PM2.5對(duì)大鼠免疫系統(tǒng)氧化及免疫損傷情況；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)睪丸生精細(xì)胞周期的變化，同時(shí)分析睪丸組織中標(biāo)志性生化指標(biāo)的含量，進(jìn)一步研究PM2.5對(duì)大鼠生殖系統(tǒng)的毒性損傷情況。 結(jié)果： 1.鎳污染區(qū)與對(duì)照區(qū)環(huán)境污染均較為嚴(yán)重，大氣顆粒物濃度較高。兩地區(qū)PM2.5濃度沒有顯著性差異，而鎳污染區(qū)PM2.5中鎳的含量是對(duì)照區(qū)48.75倍。 2.①兩區(qū)組大鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)均隨染毒劑

4、量的增加而降低，具有劑量依賴性。鎳污染區(qū)組吞噬率在低劑量即顯著降低(P<0.05)，而對(duì)照區(qū)組則在中劑量以上才有顯著性降低(P<0.05)，相同劑量下鎳污染區(qū)組吞噬率均比對(duì)照區(qū)組低，在高劑量(40.0 mg/kg)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；吞噬指數(shù)變化趨勢(shì)相似。②經(jīng)單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，肺泡上皮細(xì)胞DNA均有損傷，DNA損傷拖尾長(zhǎng)度均隨染毒劑量的增加而增加，呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系。相同染毒劑量下，在高劑量(40.0 m

5、g/kg)鎳污染區(qū)組細(xì)胞DNA損傷拖尾長(zhǎng)度大于對(duì)照區(qū)組(P<0.05)。③兩區(qū)組大鼠肺泡灌洗液(BALF)中LDH、ACP、AKP活性均增高(P<0.05或0.01)。鎳污染區(qū)組除ACP在低劑量低于對(duì)照區(qū)組(P>0.05)外，其他各劑量組ACP、AKP、LDH活性升高幅度均較對(duì)照區(qū)組大。相同染毒劑量下，鎳污染區(qū)組ACP、AKP活性在中劑量(8.0 mg/kg)高于對(duì)照區(qū)組(P<0.05)，LDH活性在高劑量(40.0 mg/kg)高于對(duì)

6、照區(qū)組(P<0.05)。④兩區(qū)組大鼠脾淋巴細(xì)胞E-花結(jié)形成率、淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)(SI)均下降，有劑量.效應(yīng)關(guān)系。對(duì)照區(qū)組淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)在中劑量降低(P<0.05)，而鎳污染區(qū)組在中劑量則顯著降低(P<0.01)。相同染毒劑量下，淋巴細(xì)胞E-花結(jié)形成率各劑量?jī)蓞^(qū)組無顯著差異(P>0.05)，鎳污染區(qū)組淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)在高劑量(40.0 mg/kg)低于對(duì)照區(qū)組(P<0.05)。⑤經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)兩區(qū)組大鼠睪丸細(xì)胞周期紊亂：二倍體細(xì)胞數(shù)均

7、明顯減少(P<0.05或0.01)，G0/G1期細(xì)胞比例均顯著降低(P<0.05)，而G2/M期細(xì)胞比例顯著增加(P<0.05)，細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)升高(P<0.05)。相同染毒劑量下，中劑量(8.0 mg/kg)鎳污染區(qū)組二倍體細(xì)胞以及G0/G1期細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)均與對(duì)照區(qū)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑥大鼠睪丸組織勻漿T-AOC、SOD活力均明顯下降，而MDA含量則明顯上升，有劑量.效應(yīng)關(guān)系。對(duì)照區(qū)組T-AO

8、C活力在高劑量升高(P<0.05)，而鎳污染區(qū)組T-AOC活力則在低劑量就顯著升高(P<0.01)；對(duì)照區(qū)組SOD活性在中劑量升高(P<0.05)，而鎳污染區(qū)組SOD活性在中劑量升高則更為顯著(P<0.01)；相同染毒劑量下，在高劑量(40.0 mg/kg)鎳污染區(qū)組T-AOC、SOD活力高于對(duì)照區(qū)組(P<0.05)，而MDA含量則低與對(duì)照區(qū)組(P<0.05)。 結(jié)論： 1.鎳污染區(qū)PM2.5成分中鎳濃度較高，是對(duì)照區(qū)的