紫金龍藥材及其治療失眠復方片劑的藥學研究.pdf

1、紫金龍Dactylicapnos scandens為罌粟科紫金龍屬植物紫金龍Dactylicapnos scandens(D.Don,),Hutch.的干燥根[1]，是我國云南省白族傳統(tǒng)習用中草藥，有鎮(zhèn)痛、止血、消炎、降壓之功效，可治療多種疼痛，在《云南省藥品標準》[2]和《云南中藥資源名錄》[3]中都有記載，曾被《中國藥典》(1977年版)[4]收載。但原標準只有性狀、理化鑒別等項，不能很好的控制藥材質量。本課題應用現代分離、分析技術

2、及方法，對紫金龍藥材進行深入研究，以提高藥材的質量標準。 紫金龍除具有上述的鎮(zhèn)痛、止血等藥理作用外，在云南民間還用于治療失眠。據此，云南省中醫(yī)中藥研究所組成了以紫金龍為君藥，治療失眠的復方制劑。經初步臨床實驗證實其治療失眠的有效率為88％；但原制劑以生藥粉直接裝膠囊，存在制備工藝粗糙、質量控制不嚴等缺點。為方便患者服用、擴大應用范圍，本課題應用藥劑學制劑技術將其研制成復方片劑。 本課題主要內容包括以下六個部分：

3、一：紫金龍化學成分的研究藥理學實驗證實生物堿是紫金龍中具有鎮(zhèn)痛等作用的主要活性成分[5]；本文針對生物堿成分采用硅膠柱層析分離、薄層板分離等方法，共分離得到4個化合物，鑒別了其中3個，分別是：異紫堇定(d-isocorydine,DS-1)，紫堇定(d-corydine,DS-2)，原阿片堿(protopine，DS-3)。并制備了純度大于98％的紫堇定對照品。 二、紫金龍藥材質量標準的研究在原有藥材質量標準的基礎上，增加了薄層

4、鑒別、含量測定等項。 以薄層色譜法鑒別紫金龍藥材，結果表明：分離效果佳，斑點清晰。 建立了同時測定藥材中4種異喹啉類生物堿的高效液相色譜方法。方法學研究表明，該法靈敏度高，準確，重現性好。測定了3批藥材中青藤堿、原阿片堿、紫堇定和異紫堇定的含量，它們的平均值分別是：0.0072％、0.86％、1.29％和2.41％。 建立了紫外分光光度法測定藥材中總生物堿含量。方法學研究表明，該法準確，可靠，重現性好。以異紫堇定

5、計，測定的3批藥材中總生物堿的含量分別是：6.11％、5.21％和6.87％。三、治療失眠復方提取工藝的研究首先建立了協(xié)同延長戊巴比妥鈉睡眠時間的失眠模型，采用該模型對不同工藝路線制備的復方提取液進行藥效學研究，以藥效學實驗結果為依據，優(yōu)選出了最佳工藝路線為水煎煮提取。 然后以異紫堇定轉移率、總生物堿轉移率和浸膏得率為指標，采用正交實驗對水提取工藝條件進行優(yōu)化，最終確定了最優(yōu)的水提工藝條件為：加10倍量水，煎煮3次，每次1小時。

6、提取工藝重現性實驗結果表明，重現性良好；說明優(yōu)化的提取工藝條件合理可行。 并以異紫堇定、總生物堿等有效成分轉移率、干膏粉得率等為指標，分別通過單因素試驗和正交試驗，對影響真空濃縮干燥和噴霧干燥制備干浸膏的影響因素進行考察，確定了干浸膏的制備方法和最優(yōu)的工藝條件為60℃真空濃縮干燥40h，且工藝重現性良好。 四、治療失眠復方片劑制備工藝研究比較了濕法擠壓制粒和流化床一步制粒等不同制粒方法，確定制粒工藝為濕法擠壓制粒。并采用

7、單因素試驗，對影響片劑制備的各種因素進行考察，確定了最佳處方和工藝條件；測定了干顆粒的臨界相對濕度值為77％，為控制片劑制備的環(huán)境條件提供依據。 五、治療失眠復方片劑質量標準及初步穩(wěn)定性試驗建立了復方片劑的鑒別和含量測定方法，并進行了片劑的常規(guī)制劑檢查。 以薄層色譜法鑒別方中君藥紫金龍、臣藥石菖蒲，結果表明分離效果佳，斑點清晰。 建立了同時測定復方片劑中異紫堇定和紫堇定含量的高效液相色譜法。方法學研究表明，該法靈

8、敏度高，準確，重現性好。測定的3批復方片劑中異紫堇定的含量分別是：2.81％、2.74％、2.77％；紫堇定的含量分別是：1.20％、1.16％、1.20％。 建立了紫外分光光度法測定復方片劑中總生物堿的含量。方法學研究表明，該法簡便，準確，靈敏度高，重現性好。以異紫堇定計，測定的3批復方片劑中總生物堿的含量分別是：7.12％、6.82％、7.10％。 檢查了復方片劑的外觀、片重差異、崩解時間等，結果均符合《中華人民共和

9、國藥典》(2005年版)一部附錄ID片劑項下的規(guī)定。 復方片劑包薄膜衣后，采用鋁塑密封包裝，進行加速試驗和長期試驗，考察其在不同條件下的穩(wěn)定性。40℃，相對濕度75％的加速試驗考察了3個月(正在繼續(xù)考察中)，片劑的外觀及紫堇定、異紫堇定、總生物堿的含量均無明顯變化；長期穩(wěn)定性試驗表明，在溫度25℃，相對濕度60％的條件下放置3個月(正在繼續(xù)考察中)，片劑的外觀及紫堇定、異紫堇定、總生物堿的含量均無明顯變化，說明本品基本穩(wěn)定。

10、 六、異紫堇定在SD大鼠體內的藥動學過程研究本文研究了異紫堇定對照品、紫金龍藥材及其治療失眠復方制劑中異紫堇定的大鼠體內藥動學過程。 首先建立了異紫堇定體內樣品的制備方法和含量測定方法；采用3倍甲醇沉淀蛋白制備血漿樣品，結果顯示：血漿中內源性物質對異紫堇定色譜峰無干擾；采用HPLC方法測定大鼠血漿中異紫堇定的濃度，結果：異紫堇定在37.968～2373ng·ml-1范圍內線性關系良好，方法的靈敏度高，回收率、重現性良好。

11、 然后采用藥代動力學軟件3P87對藥時曲線進行擬合，結果表明異紫堇定的大鼠體內過程符合一室模型；異紫堇定對照品組、紫金龍藥材組及治療失眠復方制劑組t1/2分別為57.14±24.80min、55.23±48.69min、56.05±22.46min；Tmax分別為20.00±8.94min、21.67±7.53min、18.33±4.08min；Cmax分別為1907.310±1785.872ng·ml-1、1832.215±134