分子標(biāo)記輔助選擇轉(zhuǎn)育油菜高油酸隱性核不育系.pdf

1、油菜是全球第三大植物油來源，也是我國國產(chǎn)植物油的重要來源。改良菜籽油中脂肪酸成分能提高菜籽油的食用價值和用作新型能源以及工業(yè)原料的競爭力，其中提高菜籽油中的油酸含量是油菜脂肪酸改良的重要目標(biāo)之一。本課題旨在利用分子標(biāo)記輔助選擇回交轉(zhuǎn)育甘藍(lán)型油菜高油酸隱性核不育系，為高油酸雜交種生產(chǎn)提供育種資源，并開發(fā)有效的分子標(biāo)記輔助選擇方法。主要結(jié)果如下:
　　1.通過回交轉(zhuǎn)育結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇篩選出了三個回交組合(甲ZL593A×甲9800

2、、甲ZL353A×11品6、甲ZL100A×甲9818) BC2F2群體中的高油酸不育株(ms1ms1ms2ms2)、高油酸保持株（Ms1ms1ms2ms2）、高油酸恢復(fù)株（Ms1 Ms1ms2ms2）以及BC3F1群體中基因型為AaMs1ms1的雜合型單株。同時也篩選出兩個回交組合（甲ZL360A×11品9、甲ZL353A×甲9829）BC1F1群體中基因型為AaMs1ms1的雜合型單株。
　　2.在前人研究的基礎(chǔ)上重新設(shè)計了不

3、育等位基因ms1的特異性引物，與Ms1的引物進(jìn)行雙重PCR檢測，經(jīng)過測試引物組合Ms1-2F-1，Ms1-2R-6與Ms1的引物進(jìn)行雙重PCR擴(kuò)增的效果最好，能夠一次性區(qū)分隱性純合、顯性純合、雜合型三種基因型。利用該引物組合在BC2F2群體中進(jìn)行了育性基因型的鑒定，在花期進(jìn)行的育性調(diào)查結(jié)果與鑒定出的育性基因型完全匹配，驗(yàn)證了用該引物進(jìn)行前景選擇的準(zhǔn)確性。
　　3.通過對五個回交群體（甲ZL593A×甲9800、甲ZL353A×11

4、品6、甲ZL100A×甲9818、甲ZL360A×11品9、甲ZL353A×甲9829）和五個輪回親本（甲9800、11品6、甲9818、11品9、甲9829）進(jìn)行Ms2和ms2的標(biāo)記檢測，并結(jié)合育性調(diào)查確定了五個輪回親本均含有不育基因ms2，而且為純合狀態(tài)。對96份正常可育油菜材料進(jìn)行Ms2和Ms1的標(biāo)記檢測，經(jīng)檢測有35份材料含有不育基因ms2，其中有21份材料在該位點(diǎn)為純合狀態(tài)，有14份材料在該位點(diǎn)為雜合狀態(tài);92份材料具有正常的

5、可育基因型Ms1Ms1，4份材料具有雜合的可育基因型Ms1ms1。結(jié)果表明在正?？捎筒酥杏邢喈?dāng)比例的材料也含有不育基因ms2，在Ms1位點(diǎn)大部分材為正常的可育基因型。
　　4.對三個回交組合（甲ZL593A×甲9800、甲ZL353A×11品6、甲ZL100A×甲9818）BC1F1群體的前景入選單株進(jìn)行了AFLP標(biāo)記背景選擇。經(jīng)過背景篩選，從每個回交組合中篩選出了背景回復(fù)率較高的6株單株，背景回復(fù)率最高的單株背景恢復(fù)到輪回親本

6、的90.3％。
　　5.利用目標(biāo)基因BnFAD2和Ms1的側(cè)翼標(biāo)記對三個回交組合(甲ZL593A×甲9800、甲ZL353A×11品6、甲ZL100A×甲9818) BC3F1和BC2F2群體中的前景入選單株進(jìn)行重組交換單株的篩選。經(jīng)過篩選在回交組合甲ZL593A×甲9800中得到5株在BnFAD2附近發(fā)生單交換的單株，1株在BnFAD2附近發(fā)生雙交換的單株，4株在Ms1附近發(fā)生單交換的單株，其中單株DL056-1和DL061-6