油菜隱性核不育基因特異標記開發(fā)及高油酸低亞麻酸核不育系的標記輔助選擇.pdf

1、油菜是世界范圍內(nèi)重要的油料作物之一，菜籽油是我國自產(chǎn)食用植物油的第一大來源。利用雜種優(yōu)勢可以有效地提高油菜的產(chǎn)量，而雄性不育是油菜雜交種生產(chǎn)的最主要途徑。細胞核雄性不育由于其不育性穩(wěn)定、徹底，不受胞質負效應影響等特點，在油菜雜種優(yōu)勢利用中占有越來越大的比例。目前，針對油菜細胞核雄性不育基因開發(fā)的標記，大多是與目標基因緊密連鎖的標記，而基于目標基因自身DNA序列多態(tài)性開發(fā)的功能標記很少。本研究旨在前人研究的基礎上，開發(fā)甘藍型油菜隱性核不育

2、基因BnMs1和BnMs2的特異分子標記，并將它們與高油酸、低亞麻酸分子標記結合使用，開展高油酸、低亞麻酸性狀轉育隱性核不育系的分子標記輔助選擇研究，以實現(xiàn)雜種優(yōu)勢利用與品質育種相結合，為高油酸、低亞麻酸雜交新品種選育創(chuàng)造優(yōu)良材料。主要研究結果如下:
　　 1、基于BnMs1的SNP位點和BnMs2序列長度差異，分別設計了2位點特異引物和4條等位基因特異引物，結合PCR擴增效果的優(yōu)化，獲得了在不育和可育材料中有多態(tài)性的基因特異標

3、記ZLMS1和ZLMS2。
　　 2、根據(jù)SNP位點等位基因特異引物PCR效果，發(fā)現(xiàn)僅包含一個單堿基差異的引物無法顯示SNP差異，而通過在引物3'-端第3位引入A/T錯配可得到理想的多態(tài)性擴增，但同一位置的C/T錯配擴增效果沒有A/T錯配的特異性強。這些結果對利用錯配技術提高SNP標記應用范圍具有參考意義。
　　 3、利用上述不育基因特異分子標記，對高油酸低亞麻酸轉育核不育系的各世代單株進行基因分型。在供檢測的每個世代群

4、體中，育性基因型的分離結果均與理論一致。同時，從3078個單株的BC2F1群體篩選出的10株（x2=0.089）攜帶有高油酸低亞麻酸位點的不育株，在花期進行育性調查，發(fā)現(xiàn)基因型和表現(xiàn)型均一致。
　　 4、利用油酸和亞麻酸等位基因特異分子標記，對F2代自交種子進行油酸和亞麻酸含量的分析，結果表明:在含有高油酸和低亞麻酸位點的單株中，種子油酸含量達到73％以上，亞麻酸含量低于5％，表明標記輔助選擇能在早期有效鑒定出所需基因型。