紅景天對血管性癡呆大鼠NR1及Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)和行為學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：根據(jù)中西醫(yī)對血管性癡呆的發(fā)病機(jī)理認(rèn)識，以及紅景天的研究進(jìn)展，探索紅景天改善VD動(dòng)物模型學(xué)習(xí)和記憶能力的療效，闡明部分可能的作用機(jī)理，旨在為該藥防治VD提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：1．參照Etsuko Miyamoto、Thomas等文獻(xiàn)制備雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久結(jié)扎前腦缺血致血管性癡呆模型。2．參照文獻(xiàn)采用隨機(jī)數(shù)字表將24只老鼠隨機(jī)分為3組，分別為中藥(紅景天)組，西藥(尼莫地平)組，空白模型組，另設(shè)假手術(shù)組。3．給藥方法：口服灌胃給

2、藥，給藥劑量為1ml/100g體重。術(shù)后連續(xù)給藥28天，假手術(shù)組予等量蒸餾水。4．采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)裝置及動(dòng)態(tài)圖像采集分析系統(tǒng)進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶檢測，分為定位航行試驗(yàn)、空間搜索試驗(yàn)，由計(jì)算機(jī)記錄各種參數(shù)記錄。5．HE染色觀察腦海馬區(qū)病理改變；以免疫組化檢測大鼠海馬CA1區(qū)NR1表達(dá)、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)。6．以分光光度儀檢測腦NOS吸光度，計(jì)算腦組織NOS活力。 結(jié)果：1．水迷宮訓(xùn)練的第1天起，模型組比假手術(shù)組的逃避潛伏

3、期明顯延長(P<0.05)，第4-5天差異更明顯(P<0.01)；而治療組第2天的逃避潛伏期明顯短于模型組(P<0.05)，從第4天后兩者的成績差異比較穩(wěn)定，而且具有顯著性(P<0.05)。假手術(shù)組同治療組相比逃避潛伏期差異沒有顯著性(P>0.05)。同時(shí)，4組大鼠隨著訓(xùn)練次數(shù)的增多，空間記憶能力增強(qiáng)，尋找平臺(tái)的時(shí)間在縮短。2．治療組大鼠比模型組運(yùn)動(dòng)路線的選擇及找到平臺(tái)的效率明顯提高，模型組平臺(tái)停留時(shí)間、有效區(qū)停留距離較對照組均有不同程

4、度的降低，而且具有顯著性(P<0.05)。3．假手術(shù)組未見明顯病理變化。模型組皮層下、內(nèi)囊區(qū)及海馬區(qū)結(jié)構(gòu)松散，見較大的軟化灶，伴有膠質(zhì)細(xì)胞和小血管增生；灰質(zhì)內(nèi)見部分神經(jīng)元呈缺血性形態(tài)改變，胞體縮小，周圍出現(xiàn)空暈；海馬CA1區(qū)的細(xì)胞排列紊亂，胞體明顯變小，胞核固縮，核仁消失，胞漿致密。治療組皮質(zhì)偶見小軟化灶，胞體縮小，但形狀與正常接近，數(shù)量多于模型組；海馬CA1區(qū)的胞體大小與正常接近。4．模型組NR1表達(dá)減弱，與治療組比較具有顯著性(P<

5、0.05)；癡呆模型與假手術(shù)相比，模型組NOS活性明顯增高，具有顯著性(P<0.05)；模型組與紅景天及西藥組相比NOS活性增高，有顯著性(P<0.05)。5．bcl-2、Bax在假手術(shù)組海馬CA1區(qū)有少量表達(dá)。VD模型組陽性細(xì)胞著色增強(qiáng)，數(shù)量明顯增加，其中Bax變化更為顯著(P<0.05)，bcl-2/Bax的比值較對照組明顯降低。治療組bcl-2、Bax陽性細(xì)胞也有增加，著色增深，尤其bcl-2變化顯著，bcl-2/Bax的比值較對

6、照組明顯增高，而且具有顯著性(P<0.05)。 結(jié)論：1．采用大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎造成前腦慢性缺血可較好的模擬血管性癡呆，是一種較為理想的VD模型。2．VD模型經(jīng)給予紅景天后，可改善認(rèn)知水平和病理變化，提高學(xué)習(xí)記憶能力。3．紅景天可降低VD大鼠腦海馬區(qū)NR1的蛋白表達(dá)，減輕EAA毒性，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。4．紅景天可降低VD大鼠腦組織NOS的活性，減少NO的生成。5．紅景天可調(diào)節(jié)VD大鼠海馬Bcl-2及Bax蛋白表達(dá)，抑制神經(jīng)細(xì)胞