菟絲子黃酮干預雄性幼鼠、成鼠生殖損傷及C-myc基因表達的對比研究.pdf

1、　　目的：通過觀察臨床高劑量的雷公藤多苷、菟絲子黃酮對幼鼠和成鼠的生殖作用,研究菟絲子黃酮對雷公藤多苷所致的大鼠性腺損傷的調節(jié)作用并探討其機理。為臨床科學應用雷公藤多苷,研制毒副作用更小的復方雷公藤制劑提供初步依據。
　　方法：雄性SD大鼠180只,幼鼠和成鼠各自隨機分組,每組30只,共6組,分別為幼鼠空白組(A)、幼鼠雷公藤多苷組(B)、幼鼠菟絲子黃酮組(C)、成鼠空白組(D)、成鼠雷公藤多苷組(E)、成鼠菟絲子黃酮組(F)

2、。A 組與 D 組給予 1%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃,B 組與 E 組給予雷公藤多苷片灌胃,C 組與 F組予雷公藤多苷及菟絲子黃酮灌胃。實驗期間大鼠自由進食。灌胃12周時停止喂藥,每組隨機處死 10 只動物,取左側睪丸少許組織進行 C-myc 基因研究,剩余睪丸組織進行 HE 染色觀察組織形態(tài)學變化,右側睪丸組合酶消化法制作單細胞混懸液,分析各倍體細胞的百分比、生精細胞周期及凋亡情況。停藥5周時,每組剩余動物分籠喂養(yǎng),并按雌雄1：1配對,

3、觀察各籠雌鼠一次合籠后的產仔率。
　　結果：
　　1.睪丸組織形態(tài)學觀察：兩空白組大鼠睪丸病理切片正常；兩多苷組大鼠較各自空白組相比,睪丸曲細精管腔內上皮變薄,細胞層次紊亂,精原細胞、精母細胞較少,精子細胞及精子減少明顯,某些生精細胞腫脹變性,偶見間質輕度水腫。兩黃酮組病理改變較各自多苷組輕。幼鼠組和成鼠組組間相比差異不顯著(P>0.05),幼鼠多苷組和幼鼠黃酮組、成鼠多苷組和成鼠黃酮組比較有明顯差異(P<0.05)

4、。
　　2.生精細胞各倍體百分比：相較于各自空白組,兩多苷組的 1C細胞群和2C細胞群均減少,且差異顯著(P<0.05),黃酮組較多苷組升高；幼鼠黃酮組的 1C細胞群較幼鼠多苷組相比差異顯著( P<0.05)；4C 細胞群中,兩多苷組均增加,幼鼠多苷組與空白組比較有顯著差異(P<0.05)；在 1C、2C和 4C細胞群中,幼鼠組和成鼠組相比均無統(tǒng)計學意義( P>0.05)。
　　3.生精細胞各時相百分比：相較于空白組

5、,兩多苷組 S 期細胞均值有所增加,成鼠多苷組G0/G1期細胞均值減少,但均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；且各組之間相比無顯著差異(P>0.05)。
　　4.生精細胞凋亡比例：相較于各自空白組,幼鼠、成鼠多苷組生精細胞凋亡增加,且差異顯著(P<0.05)；相較于各自多苷組,兩黃酮組凋亡減少,且差異著(P<0.05)；幼鼠組和成鼠組組間相比均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　5.雌鼠產仔率：停藥 5 周,幼鼠多苷組和

6、黃酮組大鼠一次合籠后所對應的雌鼠產仔率分別為 85%、90%；相較于空白組的平均產仔時間,兩多苷組有所延長,且差異顯著(P<0.05)；各組的平均胎仔數組間比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　6.有關基因表達：幼鼠多苷組的 C-myc基因表達量最高,幼鼠黃酮組最低。且幼鼠多苷組和幼鼠黃酮組組間比較差異顯著( P<0.05),幼鼠多苷組和成鼠多苷組、幼鼠黃酮組和成鼠黃酮組組間比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　

7、結論：
　　1.臨床高劑量雷公藤多苷對幼鼠和成鼠的生殖均有損傷,且損傷程度相仿。
　　2.菟絲子黃酮可通過抑制精子細胞和精子的凋亡來干預雷公藤多苷對大鼠生精細胞的影響。
　　3.雷公藤多苷和菟絲子黃酮對生精細胞的周期改變無顯著作用。
　　4.雷公藤多苷可能促進大鼠 C-myc基因在睪丸生精細胞中的表達,菟絲子黃酮對此有抑制作用。在使用雷公藤多苷和菟絲子黃酮后 C-m yc基因在幼鼠和成鼠生精細胞中