農桿菌介導三價融合基因(Rirol)轉化八棱海棠的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩70頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、本研究以三價融合基因Rirol為目的基因,通過農桿菌介導方法轉化八棱海棠,以期獲得矮化、耐缺鐵、抗冷、旱和鹽堿的優(yōu)良轉基因蘋果砧木。通過研究影響農桿菌介導的八棱海棠遺傳轉化的因素,優(yōu)化了八棱海棠遺傳轉化體系,建立了高效遺傳轉化體系,獲得了攜帶Rirol基因的蘋果砧木新種質。實驗內容和研究結果如下: 1.建立了八棱海棠高效的遺傳轉化體系: 研究了農桿菌菌株類型、vir基因誘導因子、Km加入時間、白化處理及懸浮液pH值對八棱

2、海棠遺傳轉化的影響,建立了以LBA4404為侵染菌,以MS<,0>+KH<,2>PO<,4>0.1mmol/L+1.0%蔗糖+0.5%葡萄糖+1mmol/L脯氨酸+75μmol/L OH-AS pH5.6為懸浮液活化菌株,侵染后葉片放到再生培養(yǎng)基上(MS+BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L)共培養(yǎng)兩天,然后轉入延后培養(yǎng)基(MS+BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L+cef 250mg/L),延后到再生苗高2cm時,將苗轉入選擇

3、培養(yǎng)基(MS+BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L+Km50mg/L)進行選擇培養(yǎng)的遺傳轉化體系。實驗結果表明,抗性苗出現(xiàn)頻率達8.4%。 2.獲得了攜帶Rirol基因的蘋果砧木新種質: 在上述體系優(yōu)化過程中獲得了84個卡那霉素抗性轉化株系,其中Gus檢測陽性的株系有65株。對65株Gus陽性株系中的24個株進行PCR擴增檢測,19個株系出現(xiàn)了與陽性質粒相同的條帶。隨機取5株PCR陽性株系,進行Southern雜交檢

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論