Bcl-2與Bid在胃癌中差異性表達(dá)的意義.pdf

1、研究背景和目的:腫瘤的發(fā)生與否與機(jī)體細(xì)胞的增殖/凋亡平衡失控密切相關(guān),當(dāng)機(jī)體細(xì)胞不斷增殖或凋亡能力下降時(shí)都可能誘發(fā)腫瘤。細(xì)胞凋亡(程序性細(xì)胞死亡)是細(xì)胞死亡的一種形式,涉及多個(gè)多種信號(hào)傳遞分子和調(diào)控基因,包括致死基因和存活基因,其中B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2 gene,Bcl-2)家族成員對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用尤為重要,這個(gè)家族中抗細(xì)胞凋亡成員Bc1-2和促凋亡成員BH3交叉域死亡受

2、體激動(dòng)劑(BH3-interacting domain death agonis,Bid)是最典型的基因,二者編碼蛋白水平的差異衡量細(xì)胞增殖/凋亡與否。近年來(lái)有大量的文獻(xiàn)證實(shí)Bid蛋白是顆粒酶B(granzyme B,GrB)發(fā)揮細(xì)胞殺傷作用的必需蛋白成分,而GrB是細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞(CTL)發(fā)揮免疫毒性效應(yīng)的重要因子,不僅在靶細(xì)胞內(nèi)通過(guò)caspase依賴或非依賴途徑發(fā)揮細(xì)胞毒性效應(yīng),抑制細(xì)胞增殖,介導(dǎo)靶細(xì)胞快速死亡;而且還具有其它生物學(xué)

3、效應(yīng),即可直接或者間接活化某些Bcl-2家族成員如Bid,誘發(fā)線粒體外膜通透性增加和線粒體中凋亡因子如細(xì)胞色素C(Cytochrome C,Cyt c)的釋放,致使細(xì)胞增殖能力下降而發(fā)生凋亡。同時(shí)也有文獻(xiàn)證實(shí)CTL在處理Bcl-2高表達(dá)的人腫瘤細(xì)胞時(shí),靶細(xì)胞能抵抗CTL介導(dǎo)的抗腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答,而當(dāng)加入Bcl-2抑制劑或用RNA干擾技術(shù)抑制腫瘤細(xì)胞中Bcl-2蛋白表達(dá)水平后,靶細(xì)胞增殖能力下降而凋亡能力明顯增加,此時(shí)CTL的細(xì)胞毒性亦

4、有顯著提高。該現(xiàn)象提示腫瘤細(xì)胞Bcl-2/Bid表達(dá)狀態(tài)對(duì)CTL介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞免疫毒性效能有明顯影響,Bid的缺乏致使腫瘤細(xì)胞不斷演進(jìn),而高表達(dá)水平的抗凋亡蛋白Bcl-2能使已處于凋亡過(guò)程中的腫瘤細(xì)胞徹底復(fù)蘇。因此,Bid缺失或Bcl-2高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞能順利逃逸CTL介導(dǎo)的免疫毒性效應(yīng),促使腫瘤的發(fā)生和演進(jìn)。胃癌是常見(jiàn)的胃腸道惡性腫瘤,許多患者由于早期無(wú)明顯癥狀和缺乏初篩手段,當(dāng)癥狀嚴(yán)重就診時(shí)已經(jīng)處于胃癌晚期并且預(yù)后不良。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑?/p>

5、于揭示Bcl-2和Bid蛋白在胃切緣上皮組織和癌組織中的差異表達(dá)水平以及二者關(guān)系,探索、研究它們與胃癌臨床演進(jìn)和預(yù)后的關(guān)系,從而為揭露腫瘤細(xì)胞中內(nèi)源性Bcl-2和Bid的表達(dá)水平可能是其逃避細(xì)胞凋亡而保持免疫自穩(wěn)態(tài)的重要機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法:本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)42例具有全部臨床資料、術(shù)前未行任何治療、已行胃癌根治術(shù)(D2術(shù))的患者胃切緣上皮組織和癌組織中Bcl-2和Bid蛋白表達(dá)水平,探索、研究二者在胃癌中的表達(dá)

6、水平與胃癌演進(jìn)的關(guān)系。
　　結(jié)果:1.Bid蛋白在42例胃切緣上皮組織和癌組織中的陽(yáng)性率依次為76.19％、26.19％,有差異(P<0.05);Bid在胃癌患者的年齡和性別無(wú)關(guān)(P>0.05),與患者分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否和TNM分期卻有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.Bcl-2在42例胃切緣上皮組織和癌組織中的陽(yáng)性率依次為69.05％、21.43％,有差異(P<0.05);Bcl-2蛋白的表達(dá)與胃癌患者的年齡、性別

7、和浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)(P>0.05),與患者分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移卻有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3.42例胃癌細(xì)胞標(biāo)本中,Bcl-2+/Bid+表達(dá)的胃癌占9.52％(4/42),Bcl-2-/Bid-表達(dá)者占14.29％(6/42);Bcl-2+/Bid-胃癌占59.52％(25/42),Bcl-2-/Bid+胃癌占16.67％(7/42);同時(shí)Bcl-2和Bid在胃癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.421,P<0.05)。<

8、br>　　討論:1.Bcl-2在胃癌組織中陽(yáng)性表達(dá)水平顯著上調(diào),Bid則呈下調(diào)狀態(tài),二者與胃癌分化程度高低、TNM分期早晚和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否有關(guān),Bid表達(dá)下調(diào)還與浸潤(rùn)深度有關(guān);這些預(yù)示Bcl-2蛋白的表達(dá)上調(diào)和Bid蛋白的表達(dá)下調(diào)降低了胃癌細(xì)胞的凋亡率,致使胃癌細(xì)胞逃逸細(xì)胞凋亡途徑而不斷增殖演進(jìn)。2.胃癌組織中Bcl-2蛋白表達(dá)上調(diào)和Bid表達(dá)下調(diào)暗示著其有著極強(qiáng)侵襲能力,同時(shí)對(duì)判斷胃癌演進(jìn)及預(yù)后有一定意義。3.Bcl-2蛋白表達(dá)上調(diào)和