人星形細(xì)胞瘤內(nèi)皮型一氧化氮合酶、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)及與血管生成關(guān)系的研究.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文人星形細(xì)胞瘤內(nèi)皮型一氧化氮合酶、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)及與血管生成關(guān)系的研究姓名：潘劍威申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：外科學(xué)（神經(jīng)外科）指導(dǎo)教師：詹仁雅周永慶2002.5.1浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文固定，梯度酒精脫水，二甲苯透明，浸蠟，常規(guī)石蠟包埋。2免疫組化染色：腫瘤組織經(jīng)常規(guī)石蠟包埋后連續(xù)切片(厚45um)，行HE和免疫組織化學(xué)法染色(SP法)?？贵w包括兔抗人VIII因子相關(guān)抗原(FVIlIRAg)多抗(1：i00)、

2、兔抗人VEGF多抗(1：t00)及兔抗人eNOS多抗(1：50)，免疫組化染色sPT。試劑盒。按其操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色，并設(shè)陽(yáng)性及空白對(duì)照。觀察測(cè)定：eNOS、7E6F、FVIIIRAg陽(yáng)性均為細(xì)胞漿著黃或棕黃色。每張免疫組化切片分別由2名研究者以雙盲法計(jì)數(shù)eNOS、VEGF、FVIIIRAg陽(yáng)性細(xì)胞。(1)選染色均勻的病變區(qū)域，在400倍視野下計(jì)數(shù)著色細(xì)胞占視野細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)(即標(biāo)記指數(shù)LI=著色細(xì)胞／視野細(xì)胞總數(shù))，共計(jì)數(shù)5個(gè)視野，

3、取平均值。按標(biāo)記指數(shù)(1abellingindex，LI)以～，，十，，表示：一：04％；：5％一25％；：26％一50％：：51％一75％，十：75％。(2)按著色強(qiáng)弱定性：陰性；弱附性；強(qiáng)陽(yáng)性。3腫瘤微血管密度測(cè)定：在400倍視野F進(jìn)行FVIIIRAg臥陛血管計(jì)數(shù)，共計(jì)數(shù)5個(gè)視野，取平均值得出每高倍鏡視野F的微血管數(shù)，即微血管密度(microvasculardensity，MVD)。4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSSl00統(tǒng)計(jì)分析軟件，各組

4、數(shù)據(jù)用單向方差分析，相關(guān)性分析用Spearman等級(jí)相關(guān)及偏相關(guān)，相關(guān)系數(shù)以r表示。結(jié)果1eNOS在星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)及與惡性程度的關(guān)系在膠質(zhì)增生中無(wú)明顯的eNOS表達(dá)于星形細(xì)胞或血管內(nèi)皮之上。低級(jí)別星形細(xì)胞瘤瘤細(xì)胞胞漿陽(yáng)性率低且多呈弱陽(yáng)性表達(dá)，而膠質(zhì)母細(xì)胞瘤則呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，且以瘤巨細(xì)胞，壞死周?chē)?yáng)性反應(yīng)最強(qiáng)(其分布情況與VEGF相一致)。間變性腫瘤則處于兩者之間。在星形細(xì)胞瘤中，隨著腫瘤惡性程度及血管密度的增加，瘤細(xì)胞陽(yáng)性率(LI)均