慢傳輸型便秘大鼠血漿內(nèi)毒素及血清腫瘤壞死因子-α含量的變化.pdf

1、目的：本課題應(yīng)用大黃建立大鼠的慢傳輸型便秘模型，通過研究慢傳輸型便秘大鼠血漿內(nèi)毒素(ET)和血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量的變化，探尋便秘影響機(jī)體生理功能的作用靶點(diǎn)，推究便秘引起機(jī)體損害的機(jī)制。 方法：1 動物模型制備 1．1動物分組：選用清潔級健康成年SD大鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為對照組及實(shí)驗(yàn)組各20只，分組后各組間體重、性別無顯著性差異，保持適宜的環(huán)境(室溫16℃～25℃：相對濕度50％～70％；清潔安靜

2、)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，開始建模。 1．2模型建立：對照組以蒸餾水灌胃飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組采用大黃浸液灌胃，首日劑量為800mg/kg(生粉)，此后每日劑量在前一日基礎(chǔ)上增加200mg/kg(生粉)，直至實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)半數(shù)大鼠糞便變稀，保持劑量至80％的稀便消失，繼續(xù)加量給藥，至又有半數(shù)大鼠糞便變稀，如此程序循環(huán)3次，待實(shí)驗(yàn)組第三次80％的稀便消失1周后停止建模，飼以普通軟飼料待處理。 2 動物處理及標(biāo)本采集 實(shí)驗(yàn)組及對照組大鼠

3、股動脈取血，每只兩管，各2mL，其中一管肝素抗凝。取血后頸椎脫臼處死大鼠，迅速開腹，觀察結(jié)直腸內(nèi)糞便儲存狀況，切取橫結(jié)腸、乙狀結(jié)腸標(biāo)本，進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察結(jié)腸壁的變化。 3 數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”(X±s)表示，采用SAS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，統(tǒng)計(jì)方法為成組T檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 結(jié)果：1、一般情況：對照組大鼠活潑好動，皮毛有光澤，大便成形，直腸和結(jié)腸末段間斷存積糞便；實(shí)驗(yàn)組建模成功后排便次數(shù)減少，蜷

4、臥、豎毛，肛門部毛發(fā)潤濕，直腸和結(jié)腸內(nèi)密集存積堅(jiān)硬的糞便，腸管輕度擴(kuò)張，腸壁粘膜可見炎癥反應(yīng)。 2、血漿ET及血清TNF-α含量：實(shí)驗(yàn)組大鼠血漿ET水平較對照組大鼠顯著增高(P<0.01)；實(shí)驗(yàn)組大鼠血清TNF-α含量較對照組大鼠顯著增高(P<0.01)。 3、HE 染色：對照組結(jié)腸壁粘膜未見炎癥反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)組可見：粘膜慢性炎癥，全層大量嗜酸性粒細(xì)胞浸潤，以固有膜為主；粘膜下肌層部分增厚，膠原纖維化；固有膜水腫，粘膜內(nèi)大量