腎舒康對家兔Masugi腎炎的治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：Mastlgi腎炎(mastlgi glomertJlonephritis MGN)是一種典型的抗腎小球基底膜性腎小球腎炎，其主要臨床表現(xiàn)為腎病綜合征，隨著疾病的發(fā)展甚至?xí)鹉I功能的嚴(yán)重?fù)p傷。目前多采用激素類、免疫抑制劑等藥物進(jìn)行治療，但其毒副作用較明顯，所以尋找具有多種治療作用、無毒或低毒的安全藥物對腎臟疾病的治療有很大的意義。我們通過給家兔注射羊抗兔腎血清制備Mastgi腎炎動(dòng)物模型，同時(shí)以中藥復(fù)方腎舒康進(jìn)行干預(yù)性治療，并設(shè)

2、雷公藤多甙組作為對照，旨在通過觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物蛋白尿、腎功能、血漿蛋白、血脂、血流變以及腎臟病理形態(tài)學(xué)的變化，來觀察。腎舒康對MGN的治療作用及其可能的機(jī)理，為臨床用藥提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。 方法：①制備兔腎抗原：取家兔腎皮質(zhì)5g研成勻漿，與弗氏完全佐劑混勻成10ml，加生理鹽水20ml，反復(fù)研磨制成油包水混懸液，即兔腎抗原。②制備羊抗兔腎血清：取上述抗原，給綿羊皮下分5處注射，每處1 ml，每2周1次，共4次。末次注射后

3、2周，采羊血，分離血清，加入經(jīng)生理鹽水洗滌3次的等量兔紅細(xì)胞，混勻，置4℃冰箱過夜使之充分吸附，離心后取上清液，于56℃水浴中滅活0.5h，此即羊抗兔腎血清(用雙向瓊脂擴(kuò)散法測定，抗血清效價(jià)為1：32)。③復(fù)制模型：選用健康新西蘭種大耳白兔(9周齡，體重2±O.25kg)，雌雄各20只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，兩次測尿蛋白均為陰性。將家兔隨機(jī)分為正常組、模型組、陽性藥物對照組、。腎舒康治療組，每組10只，除正常組外，其它各組家兔均經(jīng)耳緣靜脈注射

4、羊抗兔腎血清，每次2ml，間隔0.5h注射1次，共6次，注射6次后檢測尿蛋白為陽性，證明造模成功。于造模后的第1天開始給對照組及治療組分別灌服雷公藤多甙和腎舒康，連續(xù)4周。在造模后和動(dòng)物殺檢前收集24 h尿液進(jìn)行尿蛋白定量檢測。于第29天殺檢動(dòng)物，取血，用全自動(dòng)生化分析儀檢測各組家兔血清總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)，檢測家兔全血黏度(η b，高切、低切)、血漿黏度

5、(η p)、纖維蛋白原(Fig)、紅細(xì)胞壓積比HCT)，取腎組織行光鏡、電鏡及免疫熒光檢查。 結(jié)果： (1) 24h尿蛋白定量動(dòng)物注射羊抗兔腎血清后，除正常組外，其它各組動(dòng)物均出現(xiàn)大量蛋白尿，與正常組相比均有非常顯著差異(P<0.01)；藥物干預(yù)治療4周后，腎舒康組和雷公藤多甙組動(dòng)物的24h尿蛋白定量均明顯下降，與模型組相比均有顯著性差異(P<0.01)；其中腎舒康組尿蛋白略高于雷公藤多甙組，但兩組相比無顯著性差異(P>

6、0.05)。 (2)生化檢測模型組血清Scr、BUN與正常組相比顯著升高(P<0.01)；腎舒康組和雷公藤多甙組與模型組相比，血清Scr、BUN明顯降低(P<0.01)；兩治療組相比較，腎舒康組血清Scr、BUN略高于雷公藤多甙組，但無顯著性差異(P>0.05)。模型組血清TP、Alb較正常組明顯降低(P<0.0 1)：兩治療組血清TP、Alb與模型組相比明顯升高(P<0.01)：兩治療組相比，腎舒康組血清TP、Alb稍低于雷

7、公藤多甙組，但無顯著性差異(P>0.05)。模型組與正常組相比，血清TC、TG均明顯升高(P<0.01)；兩治療組與模型組相比，血清TC、TG明顯降低(P<0.01)；兩治療組相比，腎舒康組血清TC、TG稍高于雷公藤多甙組，但無顯著性差異(P>0.05)。模型組ηb(200sM<'-1>、5s<'-1>)、ηp、Fig、HCT與正常組相比均顯著升高(P<0.0 1)；兩治療組與模型組比較，η b(200s<'-1>、5s<'-1>)、F

8、ip、Fig、HCT均明顯降低(P<0.01)：其中‘腎舒康組各指標(biāo)均略低于雷公藤多甙組，但兩組相比無顯著性差異(P>0.05)。 (3)腎組織病理形態(tài)學(xué)觀察光鏡下：模型組可見局灶階段性腎小球硬化，多數(shù)腎小球系膜彌漫性增生，腎小球囊壁層細(xì)胞增生，偶見新月體形成；毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞變性，管腔擴(kuò)張充血；腎小管上皮細(xì)胞顆粒樣變性、腫脹，管腔狹窄，部分小管腔內(nèi)可見蛋白管型；間質(zhì)有炎細(xì)胞浸潤，可見散在的纖維增生。電鏡下可見基底膜節(jié)段性不規(guī)

9、則增厚，腎小球上皮細(xì)胞足突廣泛融合，毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞嚴(yán)重腫脹。免疫熒光可見IgG沿基底膜和系膜區(qū)點(diǎn)線狀沉積，未見補(bǔ)體C<,3>沉積。與模型組相比，腎舒康組未出現(xiàn)。腎小球硬化，系膜增生不明顯，腎小球囊內(nèi)壁光滑，未見新月體形成：毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞輕度腫脹，腎小管、間質(zhì)病變明顯減輕，基底膜增厚及毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹不明顯，腎小球上皮細(xì)胞足突僅有少量融合。免疫熒光可見少量IgG沿基底膜點(diǎn)線狀沉積，未見補(bǔ)體C<,3>沉積。雷公藤多甙組腎臟的病理改變