海水珍珠貝分子標(biāo)記分析及遺傳圖譜構(gòu)建.pdf

1、珍珠貝是生產(chǎn)海水珍珠的主要貝類，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。一些種類的分類較混亂，分子標(biāo)記方面的研究也較少。本論文目的：（1）對(duì)珠母貝屬的大珠母貝、珠母貝、黑珠母貝、白珠母貝、長(zhǎng)耳珠母貝、合浦珠母貝和珍珠貝屬的企鵝珍珠貝進(jìn)行RAPD研究，以期為珍珠貝的鑒別提供分子標(biāo)記；（2）研究AFLP標(biāo)記在合浦珠母貝家系的遺傳特點(diǎn)并構(gòu)建遺傳連鎖圖譜，為合浦珠母貝的分子標(biāo)記輔助選育奠定基礎(chǔ)。 用10個(gè)OPM和11個(gè)S系列引物對(duì)7種珍珠貝進(jìn)行RAPD擴(kuò)增

2、篩選，共篩選出4條引物（S10，S17，S358，OPM17）。4條引物共擴(kuò)增出57個(gè)位點(diǎn)，每條引物平均產(chǎn)生14.3個(gè)位點(diǎn)。擴(kuò)增片段大小在250—2000bp間，平均每種貝每條引物產(chǎn)生4.9條帶。其中引物S10對(duì)7種珍珠貝的RAPD產(chǎn)物呈現(xiàn)出物種的特異性，可同時(shí)將7種珍珠貝分開，其余引物可以將2種或2種以上的珍珠貝區(qū)別開來(lái)。這些引物可以作為種間鑒別的標(biāo)記。 3個(gè)合浦珠母貝家系的AFLP研究結(jié)果為：3對(duì)引物共產(chǎn)生57個(gè)位點(diǎn)，多態(tài)位

3、點(diǎn)比例為93.0—100.0％。3個(gè)家系總?cè)后w的基因多樣性為0.4653，平均基因多樣性為0.3997±0.0173。群體內(nèi)的基因多樣性：PII為0.4101，PSI為0.4230，PSS為0.3660。說(shuō)明不同地理來(lái)源的親本，其子代群體的基因多樣性大于同一地理來(lái)源親本所產(chǎn)生的子代群體。群體間的遺傳分化較高（G<,ST>＝0.1410）。表明這些親本組合產(chǎn)生的F1代群體內(nèi)和群體間具有較大的遺傳差異。3個(gè)家系子代間的遺傳距離：PII與PS

4、S之間的遺傳距離最遠(yuǎn)（0.1828），PII與PSI之間的遺傳距離最近（0.1327）。Minimum Evolution（ME）系統(tǒng)樹中各家系的個(gè)體分別聚合在一起，然后PII和家系PSI聚為一支，家系PSS單獨(dú)聚為一支。與子代群體間的遺傳距離相符。 在3個(gè)家系A(chǔ)FLP分析的基礎(chǔ)上，用36對(duì)引物對(duì)家系PII的親本及其子一代開展了進(jìn)一步的AFLP分析。結(jié)果為：擴(kuò)增位點(diǎn)總數(shù)1547個(gè)，其中1345個(gè)位點(diǎn)在F1代分離，202個(gè)位點(diǎn)不分

5、離，多態(tài)位點(diǎn)比例86.9％。分離位點(diǎn)中，符合孟德爾分離規(guī)律的位點(diǎn)780個(gè)，占分離位點(diǎn)數(shù)的58％。偏孟德爾分離規(guī)律的位點(diǎn)565個(gè)，占分離位點(diǎn)數(shù)的42.0％。分離比為3：1的位點(diǎn)共有764個(gè)，占分離位點(diǎn)數(shù)的56.8％，符合孟德爾分離規(guī)律的位點(diǎn)420個(gè)，占55.0％（占分離位點(diǎn)數(shù)的31.2％）；分離比為1:1的位點(diǎn)共有581個(gè)，占分離位點(diǎn)數(shù)的43.4％，符合孟德爾規(guī)律的位點(diǎn)360個(gè)，占62.0％（占分離位點(diǎn)數(shù)的26.8％）。超過(guò)半數(shù)以上的標(biāo)記