大白菜花藥培養(yǎng)體系的構(gòu)建.pdf

1、以15個(gè)大白菜品種為試材，采用花藥培養(yǎng)方法，對花藥胚狀體誘導(dǎo)的影響因素、提高花培植株獲得率的方法、花培植株繼代培養(yǎng)、生根移栽技術(shù)以及花培植株的倍性鑒定方法進(jìn)行了研究，旨在建立大白菜花藥培養(yǎng)技術(shù)體系。研究結(jié)果如下： 1.不同基因型的大白菜品種花藥培養(yǎng)小孢子胚胎發(fā)生能力有很大差異。在供試的15大白菜品種中，12個(gè)品種獲得了胚狀體。 2.花蕾形態(tài)特征與小孢子發(fā)育時(shí)期有關(guān)。細(xì)胞學(xué)觀察表明，當(dāng)花蕾長為2.0～3.0mm，花瓣與花藥

2、長度之比1/2～4/5時(shí)，50～70％的小孢子發(fā)育處于單核晚期，適合進(jìn)行花藥培養(yǎng)。 3.基本培養(yǎng)基和蔗糖濃度對小孢子胚胎發(fā)生和發(fā)育有一定影響。改良B5培養(yǎng)基對胚狀體誘導(dǎo)效果較好。改良B5培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基適宜的蔗糖濃度為10％；MS培養(yǎng)基適宜的蔗糖濃度為12％。 4.有機(jī)成分加倍后的培養(yǎng)基對胚狀體的誘導(dǎo)效果普遍優(yōu)于原基本培養(yǎng)基。 5.培養(yǎng)基中添加10mg/L的AgNO3能促進(jìn)胚狀體的產(chǎn)生，但過量的AgNO3會(huì)抑制

3、胚狀體的發(fā)生。 6.變溫處理對花藥胚狀體的發(fā)生有促進(jìn)作用。在本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的變溫處理?xiàng)l件中，高溫處理48h胚狀體的誘導(dǎo)率最高，低溫處理24h對胚狀體的誘導(dǎo)效果最好。不同高溫處理所對應(yīng)的最適低溫處理時(shí)間不同，高溫處理24h和高溫處理72h的最適低溫處理時(shí)間為48h，高溫處理48h的最適低溫處理時(shí)間為24h。 7.在一定范圍內(nèi)，胚狀體成苗率隨培養(yǎng)基水分含量的增加而降低。瓊脂含量為1.2％的培養(yǎng)基既能滿足胚狀體萌發(fā)所需要的干燥環(huán)境

4、，又能保證胚萌發(fā)所需水分，是較適合成苗的培養(yǎng)基。 8.“MS+3％蔗糖+0.8％瓊脂”是大白菜花培植株繼代和復(fù)壯培養(yǎng)最適宜的培養(yǎng)基。“1/2MS+NAA0.1mg/L+3％蔗糖+0.8％瓊脂”和“MS+NAA0.1mg/L+3％蔗糖+0.8％瓊脂”是較適宜的生根培養(yǎng)基。 9.不同基因型材料的花培植株群體中單倍體、二倍體、高倍體所占比例不同，品種和品系間花培植株自然加倍率有顯著差異。 10.根尖染色體計(jì)數(shù)、染色中心