甘藍(lán)花藥培養(yǎng)技術(shù)體系的研究.pdf

1、　　以甘藍(lán)的6種基因型為材料，進(jìn)行花藥培養(yǎng)。研究甘藍(lán)基因型和培養(yǎng)基種類對(duì)花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)以及分化培養(yǎng)的影響，并對(duì)甘藍(lán)花藥培養(yǎng)獲得的再生植株進(jìn)行倍性鑒定和植株移栽方法的研究；同時(shí)，以F2P192和F2P194為材料，研究激素、活性炭、預(yù)處理、培養(yǎng)條件、取材部位以及培養(yǎng)基中的蔗糖濃度對(duì)甘藍(lán)花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響。研究表明：　　1.基因型是影響甘藍(lán)花藥培養(yǎng)成功與否的主要因素。不同基因型的甘藍(lán)花藥培養(yǎng)的誘導(dǎo)率差異顯著，以F2代材料F2P192的誘導(dǎo)率

2、最高，為69.17﹪；而F1代材料F1S13最低，只有35.83﹪；基因型對(duì)分化率影響也很大，在6種基因型中只有F2P194和S3P202分化成苗，分化率為9.26﹪和1.61﹪。F2代材料獲得相對(duì)較高的誘導(dǎo)率。2.培養(yǎng)基種類對(duì)甘藍(lán)花藥的誘導(dǎo)培養(yǎng)和分化培養(yǎng)都具有一定影響，以B5培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基較適合甘藍(lán)花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)；分化培養(yǎng)基1/2MS+BA1.0+KT1.0+NAA0.1較適合誘導(dǎo)愈傷組織分化芽，分化率為2.27﹪；適量添加KT有

3、利于誘導(dǎo)芽的分化。3.通過(guò)花藥培養(yǎng)中獲得的甘藍(lán)再生植株容易生根，以1/2MS+KT2.0+NAA0.1+0.8﹪Agar+3﹪Suc作為生根培養(yǎng)基，生根率為100﹪；采用分步移栽的方法，可使再生植株很容易適應(yīng)外界環(huán)境條件，成活率達(dá)100﹪。4.應(yīng)用氣孔保衛(wèi)細(xì)胞長(zhǎng)度可以快速、準(zhǔn)確的鑒定再生植株倍性。5.極差分析顯示，2，4-D在花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)中具有重要的影響作用，各激素組合中以2，4-D2.0+KT2.0的激素組合較適合誘導(dǎo)培養(yǎng)。活性炭對(duì)甘

4、藍(lán)花藥培養(yǎng)沒有促進(jìn)作用，添加活性炭的處理比不添加活性炭處理的誘導(dǎo)率略低。在花藥培養(yǎng)前對(duì)花蕾進(jìn)行4℃72h的低溫預(yù)處理，并且培養(yǎng)初期給予花藥30℃72h的高溫暗培養(yǎng)，可以獲得較好的誘導(dǎo)效果，誘導(dǎo)率為25﹪；同時(shí)，級(jí)差分析顯示培養(yǎng)初期進(jìn)行高溫暗培養(yǎng)對(duì)誘導(dǎo)率的影響作用較大。在同一生長(zhǎng)時(shí)期，從同一植株的不同部位取材對(duì)甘藍(lán)花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)沒有顯著影響，花藥培養(yǎng)中沒有體現(xiàn)頂端優(yōu)勢(shì)的作用。6﹪蔗糖濃度處理的誘導(dǎo)率為30.56﹪，顯著高于3﹪蔗糖濃度的處理