蟲草菌絲粉對(duì)慢性馬兜鈴酸腎損害的防治作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本課題從尿液生化學(xué)，腎臟病理組織學(xué)兩個(gè)方面對(duì)馬兜鈴酸腎病進(jìn)行研究，旨在探討馬兜鈴酸腎病的發(fā)病機(jī)理及其防治。 尿液生化學(xué)的研究，采用關(guān)木通煎劑不間斷灌胃及馬兜鈴酸純品皮下注射法制作慢性馬兜鈴酸腎病(CAAN)大鼠模型，隨機(jī)分為四組：正常組、木通組、治療組、AA組，給藥時(shí)間為八周。以大鼠體重增長率，尿NAG酶，24小時(shí)尿蛋白定量，尿β2-微球蛋白(β2-MG)為觀察指標(biāo)。結(jié)果表明，八周后，木通組、治療組、AA組與正常組相比，大鼠體重

2、明顯降低(P＜0.01)，24小時(shí)尿蛋白定量增加(P＜0.05，P＜0.01)，尿NAG酶明顯增加(P＜0.01)，尿β2-微球蛋白(β2-MG)明顯增加(P＜0.01)。提示關(guān)木通煎劑及馬兜鈴酸純品均可導(dǎo)致腎小管功能損傷，而中草藥關(guān)木通所引起的腎損害與其所含主要成分之一馬兜鈴酸有密切關(guān)系。治療組與木通組相比，體重降低，24小時(shí)尿蛋白定量及尿β2-微球蛋白(β2-MG)定量降低，但兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療組對(duì)降低尿NAG酶

3、明顯優(yōu)于木通組及AA組(P＜0.01)提示要從統(tǒng)計(jì)學(xué)上肯定人工蟲草菌絲粉緩解慢性馬兜鈴酸腎病所引起的腎損害的作用，還需更長時(shí)間的實(shí)驗(yàn)室觀察。 病理組織學(xué)研究，組織取材于尿液生化學(xué)研究部分；分組方法相同；采用腎小管間質(zhì)病理積分，轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1)，金屬蛋白酶抑制劑1(Tissueinhibitorofmetalloproteinase-1，TIMP-1)，基質(zhì)金屬

4、蛋白酶9(Matrixmetallopfoteinase-9，MMP-9)為觀察指標(biāo)。結(jié)果表明，治療組、木通組及AA組腎小管間質(zhì)病理積分顯著高于正常組(P＜0.01)；其中馬兜鈴酸純品組腎小管間質(zhì)病理積分明顯高于木通組(P＜0.05)，治療組積分雖低于木通組，但兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。三組TGF-β1，TIMP-1，MMP-9表達(dá)較正常組明顯上調(diào)(P＜0.01)。提示①小劑量AA反復(fù)作用于腎小管上皮細(xì)胞，可使該細(xì)胞活化，活化的

5、腎小管上皮細(xì)胞可釋放轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)因子，通過細(xì)胞間的“串話”(crosstalking)作用于腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞，激活后者分泌細(xì)胞外基質(zhì)(.ECM)，導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化；分化成肌成纖維細(xì)胞的腎小管上皮細(xì)胞，還能直接分泌ECM，加重腎間質(zhì)纖維化。②AA可刺激腎小管上皮細(xì)胞MMP-9的表達(dá)，導(dǎo)致ECM合成增加，同時(shí)激活其降解作用，TIMP-1可能因反饋調(diào)節(jié)而表達(dá)增強(qiáng)，最終引起MMP-9/TIMP-1失平衡，抑制膠原降解，ECM

6、積聚，加重腎間質(zhì)纖維化。這兩種機(jī)制均可能參與了慢性AAN的形成。其中木通組TGF-β1，TIMP-1表達(dá)較治療組上調(diào)(P＜0.01)，MMP-9表達(dá)較治療組下調(diào)(P＜0.01)，提示人工蟲草菌絲粉可抑制TGF-β1，TIMP-1表達(dá)，減少細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)沉積，從而減輕腎組織病理損傷。 綜上所述，馬兜鈴酸腎毒性作用主要是導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化。其機(jī)制可能是TGF-β1，TIMP-1的釋放，觸發(fā)了腎間質(zhì)纖維化，引起腎損害。人工蟲草菌絲