雜糧蛹蟲草菌絲共生體的培養(yǎng)工藝參數(shù)優(yōu)化.pdf

1、目的:
　　探討雜糧蛹蟲草菌絲共生體主要功效成分的優(yōu)化提取條件，分析不同培養(yǎng)工藝下的功效成分含量，并對雜糧蛹蟲草菌絲共生體的培養(yǎng)工藝進(jìn)行參數(shù)優(yōu)化，為其中試生產(chǎn)和發(fā)明專利申請的實(shí)審提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　采用單因素試驗(yàn)結(jié)合響應(yīng)曲面法對不同接種量、料液比、培養(yǎng)基配比、光照時(shí)長和加奶粉量條件下雜糧蛹蟲草菌絲共生體中的蟲草素、腺苷、蟲草酸、蟲草多糖和總黃酮進(jìn)行優(yōu)化提取及含量分析，確定對以上5個(gè)考察指標(biāo)的顯著影響因素。采

2、用函數(shù)方法將5個(gè)考察指標(biāo)綜合成一個(gè)綜合指標(biāo)—綜合評分Y，以Y為響應(yīng)值，通過Box-Behnken試驗(yàn)對確定的三個(gè)顯著影響因素進(jìn)行優(yōu)化分析，確定最優(yōu)培養(yǎng)工藝。采用高效液相色譜法、分光光度法測定功效成分含量。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析及SNK法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1.不同培養(yǎng)條件下雜糧蛹蟲草菌絲共生體中蟲草素的最優(yōu)提取條件為：浸提時(shí)間6.59 h、浸提溫度81.9

3、℃、料液比1:90，在此條件下測得樣品中蟲草素含量為0.5309±0.0114~11.9629±0.0519 mg/g，腺苷含量為0.1597±0.0022~0.5590±0.0064 mg/g，且不同培養(yǎng)條件下差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0001）。對蟲草素含量影響較大的因素有接種量、光照時(shí)長和加奶粉量，對腺苷含量影響較大的因素有光照時(shí)長、加奶粉量和料液比。
　　2.不同培養(yǎng)條件下雜糧蛹蟲草菌絲共生體中蟲草酸的最優(yōu)提取條件為：料

4、液比1:26.42，浸提時(shí)間3 h，浸提溫度35℃，在此條件下測得樣品中蟲草酸含量為15.8582±0.1518~51.4719±0.6592 mg/g，且不同培養(yǎng)條件下差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0001）。對蟲草酸含量影響較大的因素有接種量、光照時(shí)長和料液比。
　　3.不同培養(yǎng)條件下雜糧蛹蟲草菌絲共生體中蟲草多糖的最優(yōu)提取條件為：微波功率568.63 W、固液比1:23.18、微波時(shí)間120 s，在此條件下測得樣品中蟲草多糖含

5、量為69.7736±3.0390~208.2109±5.5284 mg/g，且不同培養(yǎng)條件下差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0001）。對蟲草多糖含量影響較大的因素有加奶粉量、料液比和光照時(shí)長。
　　4.不同培養(yǎng)條件下雜糧蛹蟲草菌絲共生體中總黃酮含量為5.7201±0.4068~12.2699±0.0565 mg/g，且不同培養(yǎng)條件下差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0001）。對總黃酮含量影響較大的因素有接種量、料液比和光照時(shí)長。

6、>　　5.綜合單因素試驗(yàn)結(jié)果，確定光照時(shí)長（d）、接種量（mL）、加奶粉量（g）3個(gè)因素為顯著影響因素，得到雜糧蛹蟲草菌絲共生體的培養(yǎng)工藝的的最優(yōu)參數(shù)為：光照時(shí)長21.68 d，接種量7.93 mL，加奶粉量2.94 g，回歸模型極顯著（P<0.0001）且驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明相對誤差為2.46％。
　　結(jié)論:
　　蛹蟲草真菌能有效轉(zhuǎn)化雜糧，培養(yǎng)得到雜糧蛹蟲草菌絲共生體，其主要功效成分經(jīng)優(yōu)化提取含量有所提高。確定了試驗(yàn)范圍內(nèi)不同培養(yǎng)